人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒操作说明

人白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒                                                          96T

1pg/ml-40pg/ml

 

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、唾液及相关液体样本中白细胞介素1β(IL-1β)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素1β(IL-1β)水平。用纯化的人白细胞介素1β(IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素1β(IL-1β),再与HRP标记的白细胞介素1β(IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β(IL-1β)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素1β(IL-1β)浓度。 

试剂盒组成 

1

   

30倍浓缩洗涤液

   

20ml×1瓶

   

7

   

终止液

   

6ml×1瓶

   

2

   

酶标试剂

   

6ml×1瓶

   

8

   

标准品(80pg/ml)

   

0.5ml×1瓶

   

3

   

酶标包被板

   

12孔×8条

   

9

   

标准品稀释液

   

1.5ml×1瓶

   

4

   

样品稀释液

   

6ml×1瓶

   

10

   

说明书

   

1份

   

5

   

显色剂A液

   

6ml×1瓶

   

11

   

封板膜

   

2张  

   

6

   

显色剂B液

   

6ml×1/瓶

   

12

   

密封袋

   

1个

   

标本要求

 人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40pg/ml

   

5号标准品

   

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

   

20pg/ml

   

4号标准品

   

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

   

10pg/ml

   

3号标准品

   

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

   

5pg/ml

   

2号标准品

   

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

   

2.5pg/ml

   

1号标准品

   

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

   

 

 

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结:

人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

 

 

计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Human Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA试剂盒     Human Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒     

人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA试剂盒     

人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒      Human Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒     

人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒     Human Interleukin 1α,IL-1α ELISA试剂盒     

人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA试剂盒     

人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA试剂盒     

人白介素16(IL-16)ELISA试剂盒     Human Interleukin 16,IL-16 ELISA试剂盒     

人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒     Human Interleukin 13,IL-13 ELISA试剂盒     

人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒     Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA试剂盒     

人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒     Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA试剂盒     

人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒     Human Interleukin 11,IL-11 ELISA试剂盒     

人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒      Human Interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒     Human insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒     Human insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒     Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒     Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒     Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA试剂盒     

人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒      Human insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA试剂盒     

人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒      Human Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒    

人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒      Human intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA试剂盒    

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒      Human hepatocyte growth factor,HGF ELISA试剂盒     

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒     Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA试剂盒    

人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒     Human glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF ELISA试剂盒    

人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒     Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA试剂盒     

人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒     Human neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA试剂盒    

人趋化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA试剂盒     Human fractalkine/CX3CL1 ELISA试剂盒     

人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA试剂盒     Human basic fibroblast growth factor 9,bFGF-9 ELISA试剂盒     

人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA试剂盒     Human basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA试剂盒     

人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA试剂盒     Human basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA试剂盒     

人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒     Human acidic fibroblast growth factor 1,aFGF-1 ELISA试剂盒     

人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒     Human Factor-related Apoptosis ligand,FASL ELISA试剂盒     

人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒     Human Factor-related Apoptosis,FAS ELISA试剂盒     

人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒      Human E-Selectin ELISA试剂盒     

人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒     Human Eotaxin 1 ELISA试剂盒     

人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒     Human eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA试剂盒     

人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒     Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA试剂盒     

人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒     Human Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA试剂盒     

人CD30分子(CD30)ELISA试剂盒     Human Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA试剂盒    

人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒     Human CXC-chemokine receptor 1,CXCR1 ELISA试剂盒    

人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒     Human XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA试剂盒    

人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA试剂盒      Human secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC ELISA试剂盒    

人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒     Human E-Cadherin,E-Cad ELISA试剂盒     

人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒     Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA试剂盒    

人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒     Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA试剂盒    

人活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒     Human Activin A,ACV-A ELISA试剂盒    

人神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA试剂盒     human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA试剂盒    

人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒     Human Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA试剂盒     

人多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒     Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA试剂盒    

人内吗啡肽-2(EM-2)ELISA试剂盒     Human endomorphin-2,EM-2 ELISA试剂盒    

人α-内吗啡肽(α-EP)ELISA试剂盒     Human α-Endomorphin,α-EP ELISA试剂盒    

人抑制素(INH)ELISA试剂盒     Human Inhibin,INH ELISA试剂盒     

人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒      Human neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP ELISA试剂盒    

人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒     Human Orexin B,OX-B ELISA试剂盒    

人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒     Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA试剂盒    

人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA试剂盒      Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA试剂盒    

人心纳素(ANF)ELISA试剂盒      Human atrial natriuretic factor,ANF ELISA试剂盒    

人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒      Human myelin protein 2,p2 ELISA试剂盒    

人精氨酸加压素(AVP)ELISA试剂盒      Human arginine vasopressin,AVP ELISA试剂盒    

人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒     Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA试剂盒    

人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒     Human microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA试剂盒    

人神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒     Human neurofilament protein,NF ELISA试剂盒    

人利钾尿肽(KP)ELISA试剂盒      Human kaliuretic peptide,KP ELISA试剂盒    

人神经降压素(NT)ELISA试剂盒      Human Neurotensin,NT ELISA试剂盒    

人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒      Human Neurokinins B,NKB ELISA试剂盒    

人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒     Human dynorphin,Dyn ELISA试剂盒    

人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒     Human enkephalin,ENK ELISA试剂盒    

人γ肽(Pγ)ELISA试剂盒     Human Peptide γ,Pγ ELISA试剂盒    

人C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒     Human C -type natriuretic peptide,CNP ELISA试剂盒    

人阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒     Human Orexin A ELISA试剂盒    

人神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒     Human neuropeptide Y,NP-Y ELISA试剂盒    

人脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒     Human brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA试剂盒    

人乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒     Human acetylcholine,ACH ELISA试剂盒    

人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒     Human brain natriuretic peptide,BNP ELISA试剂盒    

人细胞角蛋白20(CK20)ELISA试剂盒     Human cytokeratin 20,CK20 ELISA试剂盒    

人β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒     human Beta-Endorphin,β-EP ELISA试剂盒    

人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒     Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA试剂盒    

人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒     Human Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA试剂盒     

人细胞角蛋白13(CK-13)ELISA试剂盒      Human cytokeratin 13,CK-13 ELISA试剂盒    

人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒     Human cytokeratin 17,CK-17 ELISA试剂盒     

人制瘤素M受体(OSMR)ELISA试剂盒     human oncostatin M receptor,OSMR ELISA试剂盒    

人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA试剂盒     human B-cell leukemia/lymphoma 3,Bcl3 ELISA试剂盒    

人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒     human oncoprotein induced transcript 3,OIT3 ELISA试剂盒    

人P27蛋白(P27)ELISA试剂盒     Human P27 protein ELISA试剂盒    

人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)ELISA试剂盒     Human permeability glycoprotein,P-gp ELISA试剂盒    

人大肠癌专一抗原3(CCSA-3)ELISA试剂盒     Human colon cancer-specific antigen-3,CCSA-3 ELISA试剂盒    

人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA试剂盒     Human colon cancer-specific antigen-2,CCSA-2 ELISA试剂盒    

人大肠癌专一抗原4(CCSA-4)ELISA试剂盒     Human colon cancer-specific antigen-4,CCSA-4 ELISA试剂盒    

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒     Human mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA试剂盒    

人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒     Human Intestinal trefoil factor,ITF ELISA试剂盒    

人Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒     Human Dickkopf 1,DKK1 ELISA试剂盒    

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