ELISA试剂盒阴性对照需要做梯度稀释吗
ELISA试剂盒从理论上说,阴性对照的血清,不管稀释多少倍,OD值都不应该有明显变化。有两种可能:
1.正常小鼠自身富含该抗原的抗体。
2.ELISA过程中非特异性反应去掉不洁净,如洗板、孵育温度时刻、抗原抗体浓度等,这么稀释倍数越高的样本其对成果的影响就越小,就出现逐渐下降的趋势。你的阴性孔的OD值有多少呢,正常状况应低于0.1,否则就要优化下全部试验体系了。
ELISA试剂盒判别阴阳性,以阴性OD值的2倍作为判别规范仅仅依据咱们通常的经验而定,更科学的办法是,测定一批阴性样品(比方20个以上),核算OD平均值及规范差,以平均值+2或3倍规范差作为阴阳性的界限。
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