RNase清除剂的使用方法
RNase清除剂分为固相和液相两种,是特殊的RNase灭活剂。它含有多种成分,能高效灭活玻璃、塑料表面的 RNase污染,可在5分钟内将固体表面的多达100μg的RNase彻底灭活。
液相RNase清除剂使用:
1.本品20X 液相RNase 清除剂,分装成小包装放-20℃长期保存。20X液相RNase 清除剂溶液的有效期为六个月。
2.使用时在待处理的溶液或反应液中加入 1/20 体积的 RNaseRemoverII(如:100 uL 溶液中可加 5 uL RNaseRemoverII)。 如果用于溶解提取或纯化的 RNA 样品,需要先用超纯水将 RNaseRemoverII稀释 20 倍,然后直接用于溶解 RNA(注意:稀释后的RNaseRemoverII不能长期保存,只能现配现用)。
3.60℃处理 20 分钟以使污染的 RNase 失活。
4.冷却至室温即可使用,或置于-20℃长期保存。
5.对 60℃处理敏感的酶(如 RNA 多聚酶)应在 60℃处冷却后再加入。
6.处理过的溶液随时可以再处理(60℃ 10-20 分钟),以去除任何可能发生的RNase 污染。
7.如果溶液中有不能用60℃处理的样品,也可以用37℃处理 20 分钟,但最 多只能灭活 50 ng/mL 的 RNase 。
固相RNase清除剂使用:
水的处理:直接将固相RNase清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中,混合均匀后室温放置24小时即可直接使用,得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。但如果需要溶解RNA。
工作平台的清洁:直接将固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液喷于台面,5分钟后用普通吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。
实验仪器的清洁:用浸有固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。用固相RNase 清除剂原液处理金属器械的时间不能超过5分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁:将器皿浸泡在固相RNase 清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中,静置处理5分钟后取出,再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
移液枪的清洁:根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在固相RNase清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中一分钟,再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在固相RNase清除剂的1000倍的新鲜稀释液中5分钟以上(最好不要有气泡), 然后再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍的新鲜稀释液充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。
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