ELISA试剂盒的规范曲线时应予
因此在ELISA试剂盒测定的反响过程中应尽量防止非特异性吸附,在ELISA试剂盒中通常有二次抗原抗体反响,即加标本后和加联系物后,此刻反响的温度和时刻应按规则的请求,保温容器最好是水浴箱,可使温度敏捷平衡。各ELISA试剂盒板不该叠在一同。为防止蒸腾,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的,传热简单。如用保温箱,空湿盒应预先放在其间,以平衡温度,这在室温较低时更为重要。参加底物后,反响的时刻和温度通常不做严格请求。
ELISA试剂盒而在洗刷时又应把这种非特异性吸附的搅扰物质洗刷下来。在标本和联系物的稀释液和洗刷液中参加聚山梨酯(吐温,Tween)一类物质即右达到此意图。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,为非离子型的表面张力物质,常作为助溶剂。依据脂肪酸的品种而对聚山梨酯编号,联系月桂酸的为聚山梨酯20,在ELISA试剂盒中最为常用。它的洗刷效果好,并具有削减非特异性吸附和增强抗原抗体联系的效果。
ELISA试剂盒酶标仪的可测规模视各酶标仪的功能而不一样。一般的酶标仪在0.000~2.000,新类型的酶标仪上限拓宽达2.900,乃至更高。超出可测上限的A值以"*"或"over"或其它符号表明。应注意可测规模与线性规模的不一样,线性规模常小于可测规模,比方某一酶标仪的可测规模为0.000~2.900,而其线性规模仅0.000~2.000,这在定量ELISA试剂盒中制作。 酶标仪不该安顿在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,运用前先预热仪器15-30分钟,测读成果更安稳。测读A值时,要选用产品的灵敏吸收峰,如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,首次在最适波长(W1),第2次在不灵敏波长(W2),两次测定间不移动ELISA试剂盒板的方位。
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