ELISA试剂盒斑斓的操作程序
ELISA办法的首要操作程序为:
(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加单调进行压圈。将阴性、阳性抗原及被查看抗原适度稀释后参与圈中,置37℃使硝酸纤维素膜彻底单调。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。
(2) 加酶标抗体,37℃反应一定时间后,用洗刷液洗三次。
(3)显色参与新鲜制造的底物液,37℃反应一定时间后,去掉底物液,加蒸馏水洗刷中止反应。
(4) 关闭 将硝酸纤维素膜置于关闭液中,37℃感作15-30分钟。关闭液多选用富含正常动物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(5) 加被检血清 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再参与一定量适度稀释的待检血清,37℃反应一定时间,用洗刷液洗三次,每次1-3分钟。洗刷液一般为一定浓度的PBS-Tween溶液。
(6) 效果判定 以阳性、阴恶血清作为对照,膜片基地出现深棕赤色斑斓者为阳性反应,否则为阴性反应。
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