外源性脂联素对大鼠非酒精性脂肪肝病影响的研究
探讨外源性脂联素对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的影响。方法成年SD(Sprague Dawley)远交群大鼠82只,分别予普通饮食(普通饮食组,n=12)、高脂饮食(高脂饮食组,n=70)。所有大鼠喂养4w,并处死2只大鼠做肝脏病理HE染色,以确定造模成功。将造模成功大鼠随机分为高脂饮食对照组(n=10)、脂联素给药组(10、20、30μg·kg-1·d-1)腹腔注射,每组10只,持续4w,分组处理期间,大鼠仍继续给予高脂饮食。4w后以3%戊巴比妥腹腔注射麻醉(2mL/kg),腹主动脉采血。每只大鼠取50g肝脏备用,肝组织石蜡切片苏木素-伊红(HE)常规染色。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、检测各组大叔血清总胆固醇游离脂肪酸(TC)、甘油三脂(TG)、血丙氨酸转氨酶(ALT)水平。RT-PCR法检测AdipoR2mRNA表达。结果高脂饮食组大鼠肝细胞肿胀,体积较正常明显增大,出现脂肪变性,胞质内可见大小不等的脂滴空泡,以大泡性脂肪滴为主,汇管区有以单核、淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,部分出现点状坏死和灶状坏死,已进展为NAFLD阶段,大鼠NAFLD的模型制备成功。高脂饮食对照组、脂联素10μg·kg-1·d-1组、脂联素20μg·kg-1·d-1组、脂联素30μg·kg-1·d-1组体质量、TG、TC、ALT高于普通饮食组(P<0.05)。脂联素20μg·kg-1·d-1组、脂联素30μg·kg-1·d-1组体质量、TG、TC、ALT低于高脂饮食对照组(P<0.05)。随着脂联素浓度的升高,大鼠体质量、TG、TC、ALT逐渐增加,但各给药组间以上指标差异无统计学意义(P>0.05)。与高脂饮食对照组比较,脂联素10μg·kg-1·d-1组、20μg·kg-1·d-1组、30μg·kg-1·d-1组AdipoR2基因表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。脂联素10μg·kg-1·d-1组AdipoR2mRNA表达量明显高于其他脂联素给药组(P<0.05)。高脂饮食对照组TNF-α明显升高,脂联素各给药组TNF-α低于高脂饮食对照组(P<0.05)。结论高脂饮食能使大鼠发生肝脂肪变性,具有脂肪细胞的特征,同时血脂、TNF-α水平升高。脂联素能降低大鼠血脂、TNF-α水平,改善肝功能,升高adipoR2 mRNA水平,脂联素可能在NAFLD的治疗中发挥作用。
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