同位素标记 (同位素内标)较于其同种元素的未标物具有质子数相同中子数变化的特点,通过用同位素取代特定原子来标记反应物,然后使反应物进行反应,并检测中子数变化的原子,可通过反应、代谢途径或细胞跟踪同位素。
同位素内标物与对应的未标物理化性质相似,通过光吸收和免疫的方法无法区分,在色谱中如果将同位素内标物与对应的未标物用同样的检测方法,其保留时间也几乎一致,无法分辨。
稳定性同位素内标是质谱方法即稳定性同位素稀释法独有的,在质谱(Mass)中,如果加进同位素内标,那测出来的值较未标物有很大的差值,质谱能把同位素内标和要检测的物质区分开。
上海甄准生物可供多种稳定同位素标记的内标,包括2H (氘标 D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素内标具有较大的伤害性,一般稳定性同位素可以完成的建议优选稳定性同位素内标物,若被检测物是稳定同位素内标物对应的未标物,那么,较被检测物而言,对应的同位素标记物只是将部分氢原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被检测物与对应的稳定同位素内标物理化性质基本一致,尤其在色谱中,几乎无法区分。
同样是稳定同位素标记,13C、15N相对来说比2H(氘标) 更好,所以氘标(D、2H)一般也相对而言更便宜,色谱定量中,2H、13C、15N标记的差别不大,如果需要质谱(MS)或者核磁(NMR)定量,一般建议优选13C或者15N标记。
目前同位素内标广泛应用于检测中:包括维生素检测、胆汁酸检测、激素检测、儿茶酚胺检测等。
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