ELISA检测实验中复孔稀释的关键所在
我公司一直在强调ELISA实验的重点,可能会让不少客户有些疑惑,这也是重点那也是重点,实验真的好复杂。其实不是,简便易操作正是elisa试剂盒的优点之一,当您真正熟悉与掌握了所有的实验重点之后就真的容易多了。
大家在实验中多多少少会有些问题出现,复孔的稀释步骤也不例外。那么ELISA检测实验中复孔的稀释到底有多关键呢?近日,有位客户来电表明了自己的实验疑惑:“设计ELISA复孔检查时,是对同一个样品作两次稀释,再分别加到板上的两个孔,还是只稀释一次,然后吸取两次分别加到两个孔?前者似乎把稀释时的误差也考虑到了,但做出来的结果两个孔相关挺大的。而较常使用的是哪种稀释方法?”
为了减小误差,是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问,上海远慕生物技术人员是这样解说的:
1.前者测的是稀释和移液的误差,后者只有移液误差。
2.一般都是稀释一次,分两孔吧。同浓度的分复孔。
3.由于是从同一原液稀释,一般不考虑稀释误差(稀释误差是存在的),都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是一一稀释,这样可以使稀释误差减小)。
4.复孔是为了排除移液体积,板的影响,以及其他系统误差的,要求复孔的浓度是一致的。稀释后分孔能满足此要求,一一稀释不能。
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