苏木色精染液配制方法
苏木素是组织切片最常用的细胞核染
料,H.E染色中配方甚多,染色效果也有差异,影响染色的因素颇多,未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作
用,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期,使苏木素染色达到最佳效
果,为此我们进行了以下探讨。
1方法与结果
1.1Ehrlich苏木素染液这是一种自然氧化成熟的苏木素染液,比较合理的配方
是:苏木素5g,无水乙醇200ml,硫酸铝钾20g,甘油200ml,蒸馏水100ml,冰醋酸20ml。按此方配好的苏木素染液盛人玻璃瓶内,瓶口盖
上数层纱布,放在有阳光照射的台面上,六周后成熟。此种苏木素染液经久耐用,细胞核染成深蓝色,不易褪色,我室在1958年制作的组织切片至今仍在使用。
未见褪色。Ehrlich苏木素溶液是我室常备染液,每年夏季配置一次,使用一年即换新液。
1.2Harris苏木素染液是一种添加氧化剂,使苏木素快速成熟的染液,比较合理的配方是:苏木素3g,无水乙醇20ml,硫酸铝钾20g,1g,蒸馏水500ml,冰醋酸20ml。此染液配置好后一周至三个月内使用,染色效果,不能久存,细胞核染呈紫蓝色。
1.3Carazzi苏木素染液这是近年来,我室使用较多的一种苏木素染液,用碘酸钠代替作为氧化剂,使苏木素快速成熟,安全可靠,节约染料,染色效果
优于前二种染液,比较合理的配方是,苏木素1.5g,无水乙醇5ml,硫酸铝钾20g,碘酸钠0.2g,蒸馏水400ml,甘油100ml。制备方法是;
苏木素用5ml无水乙醇溶解,蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度,勿煮沸),将溶解的苏木素和碘酸钠同时加人钾明矾水溶液内,流水冷却至室温,再加甘油,震
荡1小时后即可使用,染液可保用6个月。细胞核染呈鲜蓝色,与伊红对比鲜明亮丽,特别对于脱钙骨和长时间甲醛固定的组织染色效果同样满意。
苏木色精染液2讨论
2.1经过我们多年的实践,不断探索认为,上述三种苏木素染液的配方比例较为合理,既不会使苏木素过度氧化,给染色过程增添麻烦,也不会浪费试剂,而使苏木素的染色达到最佳效果。
2.2配制苏木素染液所用的氧化剂、媒染剂用分析纯(AR),纯度高、杂质少,才能保证苏木素的染色效果。
2.3新配方与原配方比较,主要是苏木素和硫酸铝钾的份量稍有增减,这并不影响两者结合后所形成的色精。是否改变染液的PH值,有待进一步探讨。我们认为过量的硫酸铝钾不但造成试剂的浪费,且容易使染液产生沉淀物。
2.4苏木素从配制→成熟→失效,有一个过程,如何判断其是否成熟、何时失效?现介绍一个简便的方法供参考:取一滴苏木素染液,滴入一杯自来水中,如果
沉在水底不散开,且呈红色,是未成熟的;如果很快散开,且呈紫蓝色,为成熟,此时染色效果,如果呈蓝色,表示染液失效。
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