TAE 缓冲液与 TBE 缓冲液的作用区别
分子生物学实验中常用的电泳缓冲液主要有三种:TAE、TBE 和 TPE.TBE 与 TPE 缓冲容量高,DNA 分离效果好,但 TPE 会导致 DNA 片段回收时含磷酸盐浓度高,容易使 DNA 沉淀。TAE 缓冲容量低,但价格较便宜,TBE 缓冲液含有的 EDTA 可螯合二价阳离子,可抑制 DNase 活性,防止 PCR 扩增产物降解。
TAE 缓冲液的特点:
TAE 是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE 中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状 DNA 在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约 10%,电泳大于 13 kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收 DNA 片段时也易用 TAE 缓冲系统进行电泳。TAE 的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
TBE 缓冲液的特点:
TBE 缓冲液也是常用的核酸电泳缓冲盐溶液,主要用于 DNA 的琼脂糖凝胶电泳。TBE 的主要成分是 Tris-硼酸盐与 EDTA,缓冲能力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于 1 kb 的片段时分离效果好。TBE 缓冲液中的硼酸成分会影响 DNA 回收效率以及后续的酶反应,TBE 用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使 DNA 片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。若要进行 DNA 片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验,建议使用 TAE 缓冲液。
上海远慕生物供应:产品 5×TBE 缓冲液和 50×TAE 缓冲液,货号分别为 T1050 和 T1060,5×TBE 缓冲液为 5×浓缩液,工作浓度为 0.5×,可直接用蒸馏水稀释 10 倍后使用。50×TAE 缓冲液为 50×浓缩液,工作浓度为 1×,可直接用蒸馏水稀释 50 倍后使用。若产品出现沉淀析出,请置于 37 ℃ 水浴使其溶解,不影响使用及实验效果。
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