上海远慕ELISA试剂盒供应商!
原装ELISA试剂盒与酶免elisa的原理:
酶免elisa是应用双抗体夹心法测定标本中大鼠载脂蛋白M(APO-M)水平。用纯化的大鼠载脂蛋白M(APO-M)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入载脂蛋白M(APO-M),再与HRP标记的载脂蛋白M(APO-M)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。ELISA试剂盒颜色的深浅和样品中的载脂蛋白M(APO-M)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠载脂蛋白M(APO-M)浓度。
原装ELISA试剂盒的基本原理:
1)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
2)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
原装ELISA试剂盒与酶免elisa使用须知:
酶免elisa使用须知:
1)严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
3)请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4)封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5)浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
6)各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,ELISA试剂盒以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
7)所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8)本试剂不同批号组分不得混用。
9)底物请避光保存。
原装ELISA试剂盒使用须知:
1)显现微量的免疫沉淀反应。
2)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
3)定量检测体液中抗原或抗体成份。
4)研究抗酶抗体的合成。
他们可能存在的弊端:
ELISA是目前应用最广泛的免疫标记检测方法。但由于ELISA自身存在的缺陷和某些人为因素都可造成实验性误(漏)诊的发生,分析引起实验误差因素:
1)试剂的运输与贮存ELISA试剂盒热稳定性差,遇热后灵敏度、特异性都将降低。在37℃下放置1d相当于4℃~10℃保存1.6个月,而ELISA试剂盒的货架寿命只有6个月,这样就要求试剂盒的在4℃~10℃下运输贮存,各实验室老师在试剂盒贮存环节上都能达到要求,但目前尚无法保证试剂盒的冷链运输,在炎热的夏季,试剂盒经过几天的高温,ELISA试剂盒长途运输,其货架寿命也将消耗殆进,如各实验室还按试剂说明书的有效期使用至6个月,将无法保证检测结果的准确性。
2)试剂盒质量试剂盒质量是关系到ELISA检测结果准确度的核心问题,目前ELISA试剂盒的厂家和品牌众多,产品质量也参差不齐。
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