ELISA实验因灵敏度高,特异性强在生物科研上得到了广泛的认可,但对初学者而言,如不注意实验操作过程中的各个环节,可能会对最终的实验结果产生比较大的影响,那么,在ELISA实验中应注意哪些问题呢?
在ELISA实验中应注意以下问题:
1.在实验前应该按相关要求将实验试剂平衡至室温。
2.包被抗体和检测抗体应该是有高活性的且都针对同一抗原。
3.试剂保存:蛋白抗体类试剂保存于-20摄氏度,显色液洗涤液保存于2-8摄氏度。
4.各试剂在使用前应充分混匀,以保证试剂的均一性和准确性。
5.严格控制反应温度和反应试剂。
6.洗板次数,洗板液的量,洗板液浸泡时间的长短,洗板的力度都是应该注意的问题。
7.相关浓缩液应按要求稀释到相应比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之间。
8.在终止反应时尽量避免微孔中存有气泡。
9.终止反应完成后应该在2min内完成酶标仪读数。
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