细胞划痕实验(Wound
Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
特点:
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用
4. 研究细胞迁移的体外实验中zui简单的方法。
传统实验方法实验步骤:
1. 培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记(方便拍照时定位同一 个视野)。
2. 细胞消化后接入12孔板,数量以贴壁后铺满板底为宜(数量少时可培养一段时间至铺满板底)。
3. 细胞铺满板底后,用1 ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕,尽量保证各个划痕宽度一致。(人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果,这也是该方法zui大的缺陷。)
4. 吸去细胞培养液,用PBS冲洗孔板三次,洗去划痕产生的细胞碎片。
5. 加入无血清培养基,拍照记录。
6. 将培养板放入培养箱培养,每隔4-6小时取出拍照。
7. 根据收集图片数据分析实验结果。
Culture Insert方法
1. 准备细胞,培养液,culture Insert。
2. 如图,将细胞接种于Dish中间的Insert,细胞长满Insert 区域后用镊子移除Insert即可产生500 μm宽度的划痕。
3. 每隔4-6小时拍照记录。
4. 根据收集图片数据分析实验结果。
总结:相比较于传统的划痕实验,Ibidi的设计geng科学、重现性geng好
植物检测试剂盒原理和使用方法
白介素ELISA试剂盒结果异常的原因
五种常用细胞组织染色方法介绍
标准物质期间核查内容与方法
相关产品
鸭子神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒
鸭子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA试剂盒
鸭子催乳素(PRL/LTH)ELISA试剂盒
鸭子刺鼠相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒
鸭环磷酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒
菠菜蔗糖磷酸合酶(SPS)ELISA试剂盒
菠菜葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒
菠菜凝集素(PHA)ELISA试剂盒
菠菜硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒
菠菜交替氧化酶(AOX)ELISA试剂盒
吲哚乙酸氧化酶测试盒 可见分光光度法
果胶裂解酶测试盒 微量法
吲哚乙酸氧化酶测试盒 微量法
多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 可见分光光度法
关注
拨打电话
留言咨询