血清、血浆、尿液、唾液和细胞的收集和处理方法:
1.血清:用无菌管收集,室温血液天然凝聚10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现堆积,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求挑选EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有堆积构成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
4.唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
1.培育的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融(假如重复冻融,破碎效果欠好,就选用超声波破碎),以使细胞损坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度到达100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方法,充分破碎细胞,以使细胞损坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
2.组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手艺或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗刷堆积的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
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