血浆游离血红蛋白测定实验说明

上海远慕生物科技有限公司

2020/05/29 11:30
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实验原理

??血红蛋白具有类过氧化物酶活性，可催化H2O2释放新生态氧，使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化，由无色最终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较，可测出其含量。


实验方法
??材料：
??1．2g/L邻甲联苯胺溶液
??2．1%H2O2
??3．10%醋酸溶液
??4．分光光度计
??方法：
??1.抽取静脉血2-3ml，枸橼酸钠抗凝，离心分离血浆。

??2．按下表进行操作，用分光光度计，波长为530nm，以空白管调零，测定测定管的吸光度。


试剂 （ml）
测定管
空白管
2 g/L邻甲联苯胺溶液
0.5
0.5
患者血浆
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混匀后室温放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0

室温放置10min


??3.计算公式

??血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100
实验结果计算

??参考范围：0-40mg/L


注意事项
??1.一切容器避免血红蛋白污染；
??2.采血要顺利，器皿要干燥，检测血浆要新鲜，及时分离，防止人为溶血；
??3.邻联苯胺溶液具致癌性，检测时要小心，废液要妥善处理，以免污染；
??4.双氧水要新鲜配置，浓度要准确。


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