细菌鉴定的酶类试验介绍

上海远慕生物科技有限公司

2023/06/06 10:48

　　细菌鉴定的酶类试验是细菌的生化反应中酶类的存在与否等生化特性，这些反应能够导致反应体系的PH值变化或产生显色物质，加入合适的酸碱指示剂或显色剂就可以反映出来。

　　氧化酶试验

　　氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化的细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。

　　试验方法

　　1）菌落法：直接滴加氧化酶试剂于被检菌菌落上；

　　2）滤纸法：取洁净滤纸一小块，蘸取菌少许，然后加氧化酶试剂；

　　3）试剂纸片法：将滤纸片浸泡于氧化酶试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂纸上。

　　结果判读

　　细菌在与试剂接触10s内呈深紫色，为阳性。为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。

　　临床应用及意义

　　主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。此外，也用于假单胞菌属与肠杆菌科细菌的区别，前者阳性，而后者阴性。产碱杆菌属等均为阳性。

　　异常结果：奈瑟菌属有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种致病菌，引起流行性脑脊髓膜炎

　　上呼吸道症状：鼻咽炎等全身感染症状：高热、出血点或瘀血点，脑膜炎症状：头痛、呕吐、颈项强直;引起淋病，引起新生儿淋病性眼结膜炎。

　　触酶试验

　　触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。

　　试验方法

　　取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3％的H2O2 1滴，立即观察结果。

　　结果判读

　　若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。

　　临床应用及意义

　　大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。

　　注意事项

　　① 试验时应避免接触含铁物质，以免出现假阳性。

　　② 10g/L盐酸四甲基对苯二胺或10g/L盐酸四甲基对苯二胺水溶液为无色溶液，在空气中易被氧化而失效，故应经常更换新试剂，并盛于棕色瓶中，若试剂已变成深蓝色，应弃去不用。

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