【血液细胞染色】瑞氏染色法注意事项

上海远慕生物科技有限公司

2024/10/28 09:16

瑞氏染色法的染色原理

物理吸附与化学亲和作用

嗜酸性物质→伊红+ Hb、嗜酸性颗粒

嗜碱性物质→亚甲蓝+ 细胞核蛋白、L及B胞质

瑞氏染色法的注意事项

①选用的玻片应洁净干爽、无污物潮湿，否则，有可能出现血片不洁、血细胞被玻片上的杂物损坏、以及 “潮湿”使血细胞着色产生偏差等不良后果。

②血膜厚薄要适宜，太厚或太薄均不好，太厚不仅容易造成血细胞过多过密、血膜片浓染。而日常会使部分血细胞浓缩变小、形态不佳。太薄，血片的血细胞偏少，用于教学不理想。每张血片的采血量约半粒黄豆大小为宜。推血片时，推片与血膜片约呈 45。夹角，这样制成的血膜的厚薄较为合适。

③刚推好的、血液未干的血膜片要水平放置晾干。若此时直立放置，血液就会向下流动，很多血细胞就会跑到血液流向方血膜片一侧的边上，以至血膜片中央大部分的血细胞数量相对减少。

④染色前，用甲醇将血膜片固定，能更好地保存血细胞的完好和完整，避免其变形、收缩和破碎。

⑤注意制作方法中的三处 “晾干”，否则，可能会产生血细胞着色不良、染色效果不好以及血片质量不佳等结果。

简易步骤：

1、取病料涂片、自然干燥

2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醛所固定;

3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5分钟;

4、水洗、吸干、镜检。

5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色或紫色。

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