供货周期: | 现货 |
品牌: | 远慕 |
规格: | 48t/96t |
货号: | ym-r0158 |
CAS号: | 电询 |
上海远慕生物为您提供人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒特点,用途,说明书,价格,品牌,注意事项等资讯,本司长期供应进口/国产ELISA检测试剂盒,产品种类繁多,现货供应,质量有保障,ELISA种属涵盖了科研实验所需的所有动物,为客户提供了免费代测服务,欢迎来电咨询!
中文名:人糖类抗原199(CA199)ELISA试剂盒
别名:人糖类抗原199(CA199)ELISA Kit
货号:ym-r0158
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6个月
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
检测方法:酶联免疫吸附法
检测波长:450nm
研究领域:炎症研究、神经生物学、新陈代谢、信号通路、免疫学、其他研究。
供应货期:现货供应
友情提示:仅供科研实验,不得用于其他用途;使用前仔细阅读ELISA试剂盒说明书。
人糖类抗原199(CA199)ELISA试剂盒组成及试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒特点说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒特点 实验原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CA199抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CA199抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CA199呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒特点 标本的采集及保存:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100 ng/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
人糖类抗原199(CA199)ELISA Kit生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
人糖类抗原199(CA199)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10 孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉,再各取50μl 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120 U/L ,80 U/L,40 U/L,20 U/L,10 U/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30(48T 的20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T 的20 倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
人糖类抗原199(CA199)ELISA检测试剂盒注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计3算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990 以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
8 UL– 150 U/L
人糖类抗原199(CA199)ELISA Kit相关产品如下:
猪S100钙结合蛋白A4(S100A4)ELISA试剂盒
鱼防御素β1(DEFβ1)ELISA试剂盒
大鼠溶质载体家族2(促进葡萄糖转运蛋白)成员3(SLC2A3)ELISA试剂盒
猴肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒
大鼠催产素(OT)ELISA试剂盒
鸡核糖核酸酶L(RNASEL)ELISA试剂盒
鸡谷胱甘肽还原酶(GSR)ELISA试剂盒
兔腺苷酸环化酶3(ADCY3)ELISA试剂盒
牛肠碱性磷酸酶(IAP)ELISA试剂盒
犬硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒
人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒
兔基质Gla蛋白(MGP)ELISA试剂盒
牛细胞表面粘蛋白1(MUC1)ELISA试剂盒
鸡磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C(PIPLC)ELISA试剂盒
大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒
猪抗瓜氨酸纤维蛋白原抗体(CFAb)ELISA试剂盒
小鼠核糖核酸酶A3(RNASEA3)ELISA试剂盒
牛半乳凝素8(GAL8)ELISA试剂盒
人清道夫受体B(SRB)ELISA试剂盒
绵羊基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒
猪谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒
兔IgEFc片段,低亲和力II,受体(CD23)(FCER2)ELISA试剂盒
犬巨噬细胞炎性蛋白相关蛋白1(MRP1)ELISA试剂盒
小鼠β微管蛋白(TUBB)ELISA试剂盒
马胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒
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