供货周期: | 现货 |
品牌: | 远慕 |
规格: | 48T/96T |
货号: | YB-0879 |
CAS号: |
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中文名:大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒
别名:大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒免费代测
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒主要特点如下:
专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒免费代测 本试剂盒液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
试剂盒组成:
30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个
定量分析实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中5羟色胺(5-HT)水平。用纯化的5羟色胺(5-HT)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入5羟色胺(5-HT),再与HRP标记的5羟色胺(5-HT)抗原结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的5羟色胺(5-HT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中5羟色胺(5-HT)浓度。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒免费代测 本试剂盒操作流程如下:
1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3,不用的其它试剂应包装好或盖好。
4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。
5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
8,严格按照大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒免费代测
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒使用酶标仪后操作规范:
1、使用移液器加液,移液枪头不能混用。
2、洗板要干净,避免交叉污染。
3、严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
4、请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作。
5、不要在测量过程中关闭电源。
6、对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。
7、使用后盖好防尘罩。
8、出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒进行各项实验条件的选择包括:
1. 固相载体的选择:不管何种载体,在使用前均可进行筛选,用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
2 .包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间,吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。
3 .酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份),然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
4 .酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。
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