人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒注意事项

    上海远慕生物科技为您详细讲述人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒注意事项，操作步骤，规格，价格，型号，用途，操作说明书等资讯，本司是国内科研实验试剂优质供应商，由我们所提供的进口/国产ELISA试剂盒，培养基，标准品对照品，抗体，动物血清，化学试剂，实验耗材，其他试剂都赢得了客户的一致好评，所销售的ELISA试剂盒种属更是涵盖了科研实验所需的动植物，期盼您的来电！

    中文名：人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒

    别名：人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA Kit

    供应商：上海远慕

    规格：48t/96t

    保存：2-8℃低温保存

    有效期：6个月

    用途：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。

    检测波长：450nm

    所需样本体积：50-100ul

    样本类型：适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒注意事项

    应用范围：

    ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。

    不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本，因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒注意事项：

    1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

    2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

    3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

    4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

    5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。

    6. 在配制标准品，检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

    7. 底物请避光保存。

    8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒注意事项 本试剂盒标本的采集及保存：

    1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

    注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒操作步骤：

    1. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

    4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

    5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

    6. 温育：操作同3。

    7. 洗涤：操作同5。

    8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

    9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    10.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒注意事项

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA试剂盒实验流程：

    1.实验前标准品、试剂及样本的准备；

    2.加样（标准品及样本）50μL，37℃孵育30分钟；

    3.洗板5次，加酶标试剂50ul，37℃孵育半小时；

    4.洗板5次；加入显色液A，B各50ul,37℃孵育显色15分钟

    5.加终止液50μL，立即450nm读数。

    6.计算

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA检测试剂盒特异性：

    本试剂盒用于检测人脂肪分化相关蛋白（ADRP），经检测与其它相似物质无明显交叉反应。

    由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

    精密度：

    精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%） = SD/mean×100

    批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

    批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

    批内差： CV<10%

    批间差： CV<12%

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA检测试剂盒稳定性：

    经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。

    为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

    ELISA试剂盒的储存及有效期：

    1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。

    2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

    注意：

    试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

    人脂肪分化相关蛋白（ADRP）ELISA Kit组成及试剂配制：

    1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

    2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

    3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

    4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶

    5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

    6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

    7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

    8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

    9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

    10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。