人Ⅰ型前胶原N端前肽（PⅠNP）ELISA试剂盒操作流程

人Ⅰ型前胶原N端前肽（PⅠNP）ELISA试剂盒操作流程，注意事项，用途，特点，适用范围，检测目的，价格，说明书使用等详情由上海远慕生物科技提供详细介绍，本司专业销售进口/国产ELISA检测试剂盒，培养基，抗体，细胞株，动物血清，实验耗材，化学试剂，标准品对照品，生化试剂，生物分子，不同系列的酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，抗体试剂盒，生化试剂盒，染色试剂盒，提供免费代测服务，ELISA种属包含人，豚鼠，植物，马，牛，鸭，鱼，羊，兔，猪，犬，猴及其他动物，欢迎来电订购！

中文名：人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒
别名：人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
保存温度：2-8℃
有效期：6个月
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。
使用范围：仅供科研使用,不得用于临床。
产品用途：用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
检测种属：大小鼠,人,豚鼠,兔子,猪,犬,牛羊,鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

本司ELISA试剂盒优点:
1、专业的elisa试剂盒生产企业(ELISA检测试剂盒厂家)
2、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
3、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
4、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
5、购买本公司的ELISA试剂盒，免费代检测，上海地区免费上门取样
6、技术服务要求：专业，规范，高效
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本。

人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA检测试剂盒及样品收集、处理：
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月。

人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒检测前准备工作：
1. 人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒报价请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为10ng/mL。）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品：取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。
4. 生物素化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。
5. 酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

人Ⅰ型前胶原N端前肽（PⅠNP）ELISA试剂盒操作流程：
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）。
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟。
8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒注意事项：
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

人Ⅰ型前胶原N端前肽（PⅠNP）ELISA试剂盒操作流程技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知AGEs浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中浓度呈比例关系。