供货周期: | 现货 |
品牌: | 远慕 |
规格: | 48t/96t |
货号: | ym-r00302 |
CAS号: | 电询 |
上海古朵生物科技专业供应进口/国产ELISA检测试剂盒,详细为您讲述人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒组织结构,操作步骤,注意事项,用途,特点,适用范围,价格,规格,有效期等详情,长期现货销售动物血清血浆,标准品对照品,培养基,抗体,蛋白质,化学试剂,染色液,抗生素,微生物,提供ELISA试剂盒免费代测服务,ELISA种属涵盖成千上万,包含了科研实验所需的动植物,欢迎来电咨询!
中文名:人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒
别名:人集聚蛋白(Agrin)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
适用范围:本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床。
用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。
ELISA试剂盒种属:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒组成及试剂配制
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA检测试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人集聚蛋白(Agrin)水平。用纯化的集聚蛋白(Agrin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入集聚蛋白(Agrin)抗原,再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的集聚蛋白(Agrin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人集聚蛋白(Agrin)浓度
本司ELISA试剂盒安全性:
1.避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。
4 Elisa试剂盒请远离儿童。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒组织结构:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心 23分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使
用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解
冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA检测试剂盒操作步骤:
1.
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;再各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后,在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为150
μg/L,100 μg/L ,50μg/L,25μg/L,12.5μg/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
人集聚蛋白(Agrin)ELISA试剂盒组织结构标本处理及要求:
1.血清、血浆、脑脊液、腹腔液标本可直接测定;
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.采集后尽早进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
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