荚膜染色法

2019/04/04   下载量: 1

方案摘要

方案下载
应用领域 生物产业
检测样本 其他
检测项目
参考标准 荚膜染色法 ,褐球固氮菌,

二、基本原理 荚膜是包围在细菌细胞外的一层黏液状或胶状物质,其成分为多糖、糖朊或多肽。由于荚摸与染料的亲和力弱、不易着色,而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去,所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色,在菌体周围形成一透明圈。荚膜含水量高,制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。下面介绍四种荚膜染色法,其中湿墨水法较简便,并适用于各种有荚膜的细菌。

方案下载
配置单
方案详情

一、实验目的和要求

(1)学习并掌握荚膜染色法。

(2)学习芰膜染色法的原理。

二、基本原理

荚膜是包围在细菌细胞外的一层黏液状或胶状物质,其成分为多糖、糖朊或多肽。由于荚摸与染料的亲和力弱、不易着色,而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去,所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色,在菌体周围形成一透明圈。荚膜含水量高,制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。下面介绍四种荚膜染色法,其中湿墨水法较简便,并适用于各种有荚膜的细菌。

三、实验材料与设备

1.菌种

褐球固氮菌或胶质芽孢杆菌约2d无氮培养基琼脂斜面培养物。

2.染色剂

1%甲基紫水溶液、1%结晶紫水溶液、6%葡萄糖水溶液、20%硫酸铜水溶液、甲醇、黑色素。

黑色素是一个通用名,代表一大类在大多数有机体中存在的天然色素,一般认为是酪氨酸在黑色素细胞中经过一系列氧化和聚合生成的。黑色素的配制方法为:将黑色素(5g)在蒸馏水(100mL)中煮沸5min,然后加入40%甲醛05mL,作防腐剂。试剂应至少满足但不限于如下标准:GBT 6832006《化学试剂 甲醇》、HGT 45812013《化学试剂高效液相色谱淋洗液甲醇》。

3.仪器或其他用具

载玻片、盖玻片、滤纸、显微镜等。

四、操作步骤

1.湿墨水法

1)制备茵和黑色素混合液

加一滴黑色素于洁净的载玻片上,然后挑取少量菌体与其混合均匀。也有用墨水和黑色素替换的。墨水和黑色素都属于混合物,可以溶液替换。

2)加盖玻片

将一洁净盖玻片盖在混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,轻轻按压以吸去多余的混合液。加盖玻片时勿留气泡,以免影响观察。

3)镜检

用低倍镜和高倍镜观察,用相差显微镜观察效果更好。背景灰色,菌体较暗,菌体周围明亮的透明圈即为荚膜。

2.干墨水法

1)制混合液

加一滴6%葡萄糖液水溶液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一杯黑色素,充分混匀。玻片必须洁净无油迹,否则,涂片时混合液不能均匀散开。

2)制推片

另取一段边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉。当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,之后以大约30。角迅速将混合液推向另一端,使混合液铺成薄层(214)

上一篇 RNA提取浓度过低的主要原因+解决方案
下一篇 细菌的芽孢染色法

文献贡献者

推荐方案
更多

相关产品

当前位置: 仪器信息网 上海远慕生物科技有限公司 方案 荚膜染色法

关注

拨打电话

留言咨询