台盼蓝(trypan blue)排斥实验

2019/05/14   下载量: 8

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应用领域 医疗/卫生
检测样本 其他
检测项目
参考标准 台盼蓝,

台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。 实验原理: 台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。

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台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

 

实验原理:

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。

 

实验材料 :     细胞

 

试剂、试剂盒 :台盼蓝   生理盐水

 

仪器、耗材:  显微镜  玻片   盖玻片  滴管

 

实验步骤:

      

1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同)

 

2.  0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min

 

3.  染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。

 

4.  死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。

 

5.  统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。 细胞活力(%=未染色的细胞数/观察的细胞总数 × 100

 

注意事项:

 

1.  染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。

 

2.  另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。

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