干货-如何从脑浆组织中提取外泌体？

2019/06/06   下载量： 12 次

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应用领域 生物产业
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参考标准 如何从脑浆组织中提取外泌体

外泌体是由细胞内多泡体与细胞膜融合后，释放到细胞外的一种直径约 30 ～ 150 nm 的膜性囊泡。几乎所有的细胞都会产生外泌体，被分泌出的外泌体会进入各种体液，通过循环系统到达其他细胞与组织，产生远程调控作用。 越来越多的研究表明神经系统中的生理功能和病理功能与外泌体密切相关，例如：参与神经发育和神经元活动，参与神经退行性疾病调控等。

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外泌体是由细胞内多泡体与细胞膜融合后，释放到细胞外的一种直径约 30 ～ 150 nm 的膜性囊泡。几乎所有的细胞都会产生外泌体，被分泌出的外泌体会进入各种体液，通过循环系统到达其他细胞与组织，产生远程调控作用。

越来越多的研究表明神经系统中的生理功能和病理功能与外泌体密切相关，例如：参与神经发育和神经元活动，参与神经退行性疾病调控等。

本文中整理了一种可以从脑浆组织中分离和提取外泌体的操作步骤，供大家参考！


相关试剂：

1，Hibernate E Solution（BrainBits, Springfield）

2，木瓜蛋白酶 papain（Worthington）

3，Umibio Exosome Isolation Kit

4，PBS

相关设备：

1，匀浆器

2，网状过滤器 40-μm

3，注射器过滤器 0.2μm

4，高速离心机

5，涡旋振荡器

操作步骤：

一、脑浆液化处理：

1，将新鲜或先前冷冻的小鼠半脑切开，加入 Hibernate E 溶液 (3 mL /半脑)；

2，加入 20 单位/ mL 的木瓜蛋白酶，在 37℃ 水浴 15 分钟；

3，加入等体积预冷 Hibernate E 后，轻轻匀浆；匀浆过程中在冰上进行；

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