方案摘要
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参考标准 | 实验方法原理: 用SPI 培养基和 SPII 培养基结合EGTA进行转化 |
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于:(1)建立枯草芽孢杆菌转化体系;(2)其基因改造;(3)提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于:(1)建立枯草芽孢杆菌转化体系;(2)其基因改造;(3)提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。
化学法:
实验方法原理: 用SPI 培养基和 SPII 培养基结合EGTA进行转化。
实验材料: 枯草芽孢杆菌168
试剂 试剂盒: SPI 培养基 EGTA SPII 培养基 柠檬酸钠 EGTA 氢氧化钠 KH2PO4 K2HPO4 MgCl2 MgSO4 葡萄糖 酵母膏 ( NH4 )2SO4
仪器 耗材:培养箱 培养皿 锥形瓶 紫外分光光度计 接种环 离心管
实验步骤:
一、试剂配制
1. SP 盐
0.2%( NH4 )2SO4,1.4% K2HPO4,0.6% KH2PO4, 0.02% MgSO4·7H2O, 0.1% 柠檬酸钠。
2. CAYE (100x)
2% Casamino acid,10%酵母膏。
3. SPI 培养基
SP 盐溶液加入1 %体积浓度为50%葡萄糖溶液,1 %体积100xCAYE 溶液。
4. SPII 培养基
SPI 培养基加入1 %体积50 mmol/L CaCl2 溶液,1 %体积250 mmol/L MgCl2 溶液。
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