枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备实验

2019/07/16   下载量: 1

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应用领域 生物产业
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参考标准 实验方法原理: 用SPI 培养基和 SPII 培养基结合EGTA进行转化

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于:(1)建立枯草芽孢杆菌转化体系;(2)其基因改造;(3)提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。

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枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于:(1)建立枯草芽孢杆菌转化体系;(2)其基因改造;(3)提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。

 

化学法:

实验方法原理: SPI 培养基和 SPII 培养基结合EGTA进行转化。

 

实验材料: 枯草芽孢杆菌168

 

试剂 试剂盒: SPI 培养基 EGTA  SPII 培养基  柠檬酸钠  EGTA  氢氧化钠  KH2PO4  K2HPO4  MgCl2   MgSO4  葡萄糖  酵母膏  ( NH4 )2SO4

 

仪器 耗材:培养箱 培养皿 锥形瓶 紫外分光光度计 接种环 离心管

 

实验步骤:

一、试剂配制

 

1.  SP

 

0.2%( NH4 )2SO41.4% K2HPO40.6% KH2PO4 0.02% MgSO4·7H2O 0.1% 柠檬酸钠。

 

2.  CAYE (100x)

 

2% Casamino acid10%酵母膏。

 

3.  SPI 培养基

 

SP 盐溶液加入1 %体积浓度为50%葡萄糖溶液,1 %体积100xCAYE 溶液。

 

4.  SPII 培养基

 

SPI 培养基加入1 %体积50 mmol/L CaCl2 溶液,1 %体积250 mmol/L MgCl2 溶液。

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