ELISA试剂盒出现假阳性,背景高,花板原因+解决方案

2024/05/06   下载量: 0

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应用领域 生物产业
检测样本 其他
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对于间接进口ELISA检测试剂盒标本一般都要进行稀释,如果加样不准就会造成误差,尤其当稀释倍数大时,很小的绝对误差,会导致较大的相对误差,使阴性(或弱阳性)标本呈阳性(或阴性)。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。目前,大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本,可较好地避免以上误差。

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  ELISA看似简单,实则不然,远慕列举了Elisa实验中常见的一些问题及解决方案。希望对各位从事科研工作的小伙伴有所帮助。

  1.加样时污染    

  解决方法:注意更换枪头,尽可能避免污染

  2.加酶时污染    

  解决方法:对先加样后加酶的操作,加酶时要注意吸头不要接触标本,造成污染。当可能造成污染时,一定要更换吸头,切忌侥幸心里

  3.恒温箱温度过高    

  解决方法:注意控制恒温箱温度,尽可能让其稳定在37士0.5℃

  4.整个操作时间过长、造成反应时间不同(第一孔与最后一孔反映应时间相差很悬殊)。气温高时更明显    

  解决方法:在尽可能短的时间内完成操作;尽量不要堆积块板子操作(尤其手工操作时)

  5.洗液稀释倍数过高    

  解决方法:按照要求倍数稀释洗液

  6.洗板时浸泡时间不够    

  解决方法:按要求操作,并适当延长浸泡时间

  7.洗板次数不够    

  解决方法:按要求操作,不可任意减少洗板次数

  8.手工洗板方式不对    

  解决方法:洗板时垂直加入洗液,并保证一定的冲击力;洗板要注满板孔,并保证30-60秒的浸泡时间

  9.酶、显色液污染    

  解决方法:使用容器要注意容器的清洁,避免污染

  10.显色完后没有终止反应    

  解决方法:显色完立即终止反应

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