供货周期: | 现货 |
品牌: | 抚生 |
规格: | 25个 |
型号: | 5×105 |
货号: | A01X1342 |
有效期: | 12月 |
标准值: | T25培养瓶 |
人膀胱癌相关成纤维细胞
商品属性:
产品名称 | 人膀胱癌相关成纤维细胞 | 组织来源 | 手术切除的膀胱癌组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | A01X1342 |
英文名称 | Human primary bladder cancer associated fibroblasts;CAFs | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞详述:
膀胱癌是一种泌尿生殖系统肿瘤,发病率和死亡率较高,膀胱癌分为非肌浸润性膀胱癌与肌肉浸润性膀胱癌。
肿瘤微环境理论认为,肿瘤微环境与细胞外基质是肿瘤对化疗反应的重要决定因素。肿瘤微环境包括和非细胞,以及细胞外成分,在肿瘤复发和转移中起着重要的作用。其中,非细胞主要由肿瘤相关成纤维细胞构成。
成纤维细胞是实体瘤中主要的细胞,它们结合结缔组织的细胞外基质,是组织结构完整性的基础。已有研究表明,肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤演进的重要促进剂,它们可通过分泌一种或多种可溶性因子如细胞因子、生长因子、趋化因子和基质降解酶等,肿瘤细胞响应这些可溶性因子作用,进而改变肿瘤细胞的生长方式机器发展演进过程。
细胞特征:
1)细胞来源于手术切除的膀胱癌组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免yi荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
注意事项:
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。
4)分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。
操作过程:
1)制备细胞悬浊液,计数并用培养液调整细胞密度。
2)在培养皿中加入足够的培养液。
3)将欲接种的细胞接种到培养器皿中。
4)在培养皿内放入一个有聚四氟乙烯包被的磁棒。将培养皿封口,送入恒温箱内。在磁力搅拌器上边搅拌边培养。若接种培养瓶或试管中,封口后可将培养器皿固定在恒温摇床上,边摇动边培养,无需放置磁棒。有些细胞也可以不用磁棒或磁力搅拌器,也不必使用恒温摇床,接种于预先用硅脂包被的培养器皿内直接在培养箱中静置培养即可。
5)培养液略呈黄色换液。吸出部分旧培养液,加入新鲜培养液即可。
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