人轮状病毒抗原(RV Ag)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人轮状病毒抗原(RV Ag)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人轮状病毒抗原(RV Ag)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人轮状病毒抗原(RV Ag)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZB837Mu 小鼠白介素2受体α(IL2Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Alpha (IL2Ra)
HZC019Mu 小鼠血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Activating Factor Acetylhydrolase 2 (PAFAH2)
HZD013Mu 小鼠X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 5 (XRCC5)
CED066Mu 小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apelin (APLN)
HZL085Mu 小鼠含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for STIP1 Homology And U-Box Containing Protein 1 (STUB1)
HZA685Mu 小鼠CD14分子(CD14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14)
HZB393Mu 小鼠转录激活因子6(ATF6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activating Transcription Factor 6 (ATF6)
HZB726Mu 小鼠CD163分子(CD163)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163)
HZC243Mu 小鼠拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Topoisomerase I (TOP1)
HZD177Mu 小鼠对氧磷酶2(PON2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Paraoxonase 2 (PON2)
HZE975Mu 小鼠真核翻译起始因子2α激酶3(EIF2αK3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 3 (EIF2aK3)
HZF914Mu 小鼠核苷酸还原酶M1(RRM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1)
HZG992Mu 小鼠α-生育酚转运蛋白(TTPα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha Tocopherol Transfer Protein (TTPa)
HZJ244Mu 小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)
HZJ282Mu 小鼠DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for DNA Damage Inducible Transcript 3 (DDIT3)
HZC006Mu 小鼠白介素8受体β(IL8Rβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Beta (IL8Rb)
HZF198Mu 小鼠岩藻糖基转移酶8(FUT8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fucosyltransferase 8 (FUT8)
HZH050Mu 小鼠线粒体转录因子A(TFAM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transcription Factor A, Mitochondrial (TFAM)
HZC969Mu 小鼠组织蛋白酶Z(CTSZ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin Z (CTSZ)
HZA048Mu 小鼠抑制素βE(INHβE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inhibin Beta E (INHbE)
HZB361Mu 小鼠毛细血管扩张性共济失调突变因子(ATM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ataxia Telangiectasia Mutated (ATM)
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