ELISA试剂盒的五大代测方法
ELISA试剂盒试验中常会遇到这些疑问:
1. 温育条件纷歧致,技术建议:恒温箱温育较水浴显色深,OD值高出0.1-0.15,均选用恒温箱。如用水浴水温应控制在37℃。
2. 样品数量纷歧,加样时刻长短纷歧。当重复某相同品时,加样时刻尽可能与首次接近。
考虑到有些客户没有试验设备,我公司还能够供给代测效劳,只需付试剂盒的费用,代测是免费的哦!
间接法 :此测定方法与直接法类似,纷歧样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
双抗体夹心法 :被检查的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。
ELISA试剂盒另一个则是检查抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。
这两种抗体有必要当心挑选,才可防止交互反应或竞赛相同的抗原联络部位。
竞赛法:样本里的抗原(安闲抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一同竞赛相同的抗体,当样品里的安闲抗原越多,就能够联络越多的抗体,而固定抗原就只能联络到较少的抗体,反之亦然。
经清洗进程,洗去安闲抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只需固定抗原的对照组效果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
ELISA试剂盒直接法 :将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
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