ELISA试剂盒保温方法

ELISA试剂盒保温方法

在树立ELISA试剂盒办法作反响动力学研讨时，实验标明，两次抗原抗体反响通常在37℃经1～2小时，产物的天然生成可达高峰。湿盒应先放在保温箱中预温至划定的温度，特别是在气温较低的时候更应如斯。抗原抗体反响的完结需求有必定的温度和时刻，这一保温进程称为温育，有人称之为孵育，在ELISA试剂盒中似不恰当。这就是为何ELISA反响老是需求必定时刻的温育。为加速反响，可前进反响的温度，有些实验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的联系只在固相表面上发作。
ELISA试剂盒温育常选用的温度有43℃、37℃、室温柔4℃等。室温温育时要平置于操作台上即可。这是一个逐渐平衡的进程，因而需经分散才干到达反响的终点。通常有两次抗原抗体反响，即加标本和加酶联系物后。不管是水浴仍是湿盒温育，反响板均不宜叠放，以保证各板的温度都能敏捷平衡。以抗体包被的夹心法为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不是都有平等的和固相抗联系的时机，只要最靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体联系的适宜温度。
保温的方法除有的ELISA试剂盒仪器附有特制的电热块外，通常均选用水浴，可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度敏捷平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜笼盖板孔，此刻可让反响板漂浮在水面上。若用保温箱，应放在湿盒内，湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最终将ELISA板放在湿纱布上。应留心温育的温度和时刻应按划定力求正确。抗原抗体反响4℃更为完全，在放射免疫测定中多使反响在冰箱中过夜，以构成最多的沉积。室温温育的反响，操作时的室温应严厉约束在划定的范围内，尺度室温温度是指20～25℃，但具体操作时可根据仿单的请求操控温育。在这以后参加的酶符号抗体与固相抗原的联系也相同如斯。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板一起测定.。但因所需时刻太长，通常不予选用。