胚胎成纤维细胞,NIH/3T3细胞

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产品名称：胚胎成纤维细胞,NIH/3T3细胞

细胞纯度：94％

细胞活力：98％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

细胞冻存：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+20%FBS）

细胞 运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）

细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗

培养条件：Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS　

传代方法：1:3传代,2-3天传一代

传代情况：C8

冻存条件：基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测： 阴性　

细胞的传代:对于贴壁细胞应先吸（倒）尽培养基，吸的越干净越好，胚胎成纤维细胞,NIH/3T3细胞以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。

实验操作步骤：

a．采用认可的方案处死啮齿动物。    

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。  

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。   

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。   

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。   

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

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