小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒

温育是小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

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hzA053Ra 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)

hzA146Ra 大鼠血管内皮生长因子D(VEGFD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

hzA054Ra 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)

hzA055Ra 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)

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hzA145Ra 大鼠血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC)

hzA058Ra 大鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)

hzA144Ra 大鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB)

hzA059Ra 大鼠白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A)

hzA141Ra 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Plasminogen Activator, UrokinaHZ ReHZptor (uPAR)

hzA140Ra 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Plasminogen Activator, UrokinaHZ (uPA)

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hzA134Ra 大鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb)

hzA130Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of MetalloproteinaHZ 4 (TIMP4)

hzA129Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of MetalloproteinaHZ 3 (TIMP3)

hzA128Ra 大鼠组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of MetalloproteinaHZ 2 (TIMP2)

hzA126Ra 大鼠内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for TEK Tyrosine KinaHZ, Endothelial (Tie2)

hzA125Ra 大鼠免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tyrosine KinaHZ With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)

hzA122Ra 大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Stromal HZll Derived Factor 1 (SDF1)

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