供货周期: | 现货 |
品牌: | eBioscience |
规格: | 96t/48t |
货号: | HZA662Mu |
CAS号: |
温育是小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。
温育这一步是临床小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:
(1)要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
(2)温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中,指出温育温度可有两种,例如,一种是37℃下1小时,另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2~8℃下反应24小时。较高的反应温度,由于分子运动的加怜惜,反应时间缩短,这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题,但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此,我们建议在临床小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。
(3)“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深,产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规 ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。
总而言之,在临床小鼠白介素7(IL7)检测试剂盒测定中,要保证好的测定效果,可采用下述简单办法来确保温育条件,即尽量采用水浴,温育中让微孔板浮于水面上,或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒,放于温箱中,这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触,以及水浴箱或湿盒内的高温度,而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。
hzF880Ra 大鼠分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for HZcreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1)
hzC442Ra 大鼠双肾上腺皮质激素(DCX)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Doublecortin (DCX)
hzE118Ra 大鼠肝配蛋白B受体3(EPHB3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ephrin Type B ReHZptor 3 (EPHB3)
hzF609Ra 大鼠肌微管素相关蛋白9(MTMR9)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9)
hzF834Ra 大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(TRPM4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transient ReHZptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4)
hzD513Ra 大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体2(CRHR2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone ReHZptor 2 (CRHR2)
hzD558Ra 大鼠丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶6(MAP3K6)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Mitogen Activated Protein KinaHZ KinaHZ KinaHZ 6 (MAP3K6)
hzB019Ra 大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 4 (ANGPTL4)
hzB699Ra 大鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3)
hzA518Ra 大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ferritin (FE)
hzH519Ra 大鼠神经突蛋白1(NRN1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Neuritin 1 (NRN1)
hzC374Ra 大鼠羧酸酯酶1(HZS1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for CarboxylesteraHZ 1 (HZS1)
hzE675Ra 大鼠再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha (REG3a)
hzC842Ra 大鼠分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for HZcreted Frizzled Related Protein 5 (SFRP5)
hzH839Ra 大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Isocitrate DehydrogenaHZ 1, Soluble (IDH1)
hzG393Ra 大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ATPaHZ, H+ Transporting, Lysosomal AcHZssory Protein 2 (ATP6AP2)
hzA752Ra 大鼠环腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cyclic ADP RiboHZ HydrolaHZ (cADPRH)
hzL907Ra 大鼠N-myc下游调节基因2(NDRG2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for N-myc Downstream Regulated Gene 2 (NDRG2)
hzD063Ra 大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 8 (HSPA8)
hzD195Ra 大鼠Ⅲ型胶原α1(COL3α1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Collagen Type III Alpha 1 (COL3a1)
hzH492Ra 大鼠骨织素(OSTN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Osteocrin (OSTN)
hzC586Ra 大鼠线粒体解偶联蛋白2(UCP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Uncoupling Protein 2, Mitochondrial (UCP2)
hzC126Ra 大鼠腱蛋白(CHRD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Chordin (CHRD)
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hzA979Ra 大鼠亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cyclophilin A (CYPA)
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