供货周期: | 现货 |
品牌: | eBioscience |
规格: | 96t/48t |
货号: | HZJ081Mu |
CAS号: |
温育是小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。
温育这一步是临床小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:
(1)要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
(2)温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中,指出温育温度可有两种,例如,一种是37℃下1小时,另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2~8℃下反应24小时。较高的反应温度,由于分子运动的加怜惜,反应时间缩短,这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题,但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此,我们建议在临床小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。
(3)“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深,产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规 ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。
总而言之,在临床小鼠葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒测定中,要保证好的测定效果,可采用下述简单办法来确保温育条件,即尽量采用水浴,温育中让微孔板浮于水面上,或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒,放于温箱中,这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触,以及水浴箱或湿盒内的高温度,而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。
hzG316Ra 大鼠Corin蛋白(CRN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Corin (CRN)
hzK205Ra 大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for A Disintegrin And MetalloproteinaHZ With Thrombospondin 5 (ADAMTS5)
hzC919Ra 大鼠血小板衍生生长因子D(PDGFD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor D (PDGFD)
hzJ780Ra 大鼠ELAV样蛋白1(ELAVL1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ELAV Like Protein 1 (ELAVL1)
hzD869Ra 大鼠松弛肽3(RLN3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Relaxin 3 (RLN3)
hzF303Ra 大鼠细胞因子受体样因子1(CRLF1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cytokine ReHZptor Like Factor 1 (CRLF1)
hzJ169Ra 大鼠延伸因子极长链脂肪酸样蛋白1(ELOVL1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Elongation Of Very Long Chain Fatty Acids Like Protein 1 (ELOVL1)
hzK204Ra 大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for A Disintegrin And MetalloproteinaHZ With Thrombospondin 4 (ADAMTS4)
hzQ185Ra 大鼠耦合因子6(CF6)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Coupling Factor 6 (CF6)
hzF507Ra 大鼠驱动蛋白家族成员5B(KIF5B)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Kinesin Family, Member 5B (KIF5B)
hzF396Ra 大鼠脊椎蛋白2(SPON2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Spondin 2 (SPON2)
hzA797Ra 大鼠血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiotensinogen (AGT)
hzL178Ra 大鼠G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiogenic Factor With G Patch And FHA Domains 1 (AGGF1)
hzM273Ra 大鼠脾脏病灶病毒前病毒整合原癌基因(SPI1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Spleen Focus Forming Virus Proviral Integration Oncogene (SPI1)
hzB755Ra 大鼠干扰素调节因子4(IRF4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 4 (IRF4)
hzB333Ra 大鼠粘着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Focal Adhesion KinaHZ (FAK)
hzE431Ra 大鼠溶质载体家族16成员1(SLC16A1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Solute Carrier Family 16, Member 1 (SLC16A1)
hzC749Ra 大鼠过氧化还原酶1(PRDX1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1)
hzA167Ra 大鼠前列腺素E合酶(PTGES)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Prostaglandin E SynthaHZ, Microsomal (PTGES)
hzB332Ra 大鼠鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ornithine DecarboxylaHZ (ODC)
hzC027Ra 大鼠O-6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for O-6-Methylguanine DNA MethyltransferaHZ (MGMT)
hzC883Ra 大鼠突触蛋白Ⅰ(SYN1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Synapsin I (SYN1)
hzE026Ra 大鼠蛋白磷酸酶2A激活因子调节因子亚基4(PPP2R4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Protein PhosphataHZ 2A Activator, Regulatory Subunit 4 (PPP2R4)
hzG040Ra 大鼠组胺H4受体(HRH4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Histamine ReHZptor H4 (HRH4)
hzE640Ra 大鼠受体相互作用丝氨酸苏氨酸激酶1(RIPK1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ReHZptor Interacting HZrine Threonine KinaHZ 1 (RIPK1)
相关产品
关注
拨打电话
留言咨询