挑选ELISA试剂盒看类型
ELISA试剂盒试验类型
ELISA试剂盒有多种类型,不过它们都有一个一同特征,就是进行抗原捕获。
一般捕获方法包含将抗原吸附到微孔板或许用微孔板上的抗体进行捕获。
ELISPOT有点像蛋白印迹Westernblot,先在带膜的微孔板中培育细胞,然后在膜上检查细胞排泄的抗原构成斑驳。
In-cellELISA和酶联免疫斑驳ELISPOT是两种格外的类型,In-cellELISA需要将微孔板中培育的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检查。
此外,还需要根据本身需要挑选96孔板或是384孔板进行ELISA试验。
ELISA试剂盒抗体类型
咱们不希望捕获抗体与检查抗体竞赛抗原上的同一位点,为此咱们就需要保证捕获抗体和检查抗体所辨认的抗原表位不存在堆叠。
例如,对于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检查有时更有帮助。
要防止这一疑问,咱们能够挑选收买“matchedpair"的捕获/检查抗体对,这些打包在一同的抗体是商家经过验证才举荐的好组合。
多抗能够保证捕获全部抗原,随后单抗再特异性检查具有特定抗原表位的抗原。
双抗夹心法ELISA中捕获抗体与检查抗体(不管多抗仍是单抗)的配对很有考究。
假设捕获抗体和检查抗体之间发生了冲突,就会对试验效果发生较大影响。
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA,实际上有时候二者联络效果非常好。
ELISA试剂盒检查方法
现在检查ELISA有许多途径,咱们能够根据自个的偏好进行挑选。
酶能够联络在一抗上,也能够联络在二抗上,还能够运用链霉亲和素符号的酶与亲和素符号的一抗联络。
此外ELISA的效果检查还包含放射性检查、荧光检查、化学发光或显色法检查等。
一般ELISA检查的是酶促反响的可溶性产品,抗体上联络有相应的酶(例如一般运用的辣根过氧化物酶HRP),而反响系统中增加有相应的底物(如3,3-二氨基联苯胺DAB)。
这种酶促反响生成具有特征性的色彩,能够经过分度计进行检查,碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。
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