ELISA测定试剂盒手工操作有浸泡式和流水冲刷式两种,浸泡式进程如下:
A、吸干或甩干孔内反响液;
B、用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去);
C、浸泡,行将洗刷液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇晃,浸泡时间不行随意缩短;
D、吸干孔内液体,吸干应完全,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
E、重复操作c和d,洗刷3-4次(或按阐明规则)。
削减ELISA测定试剂盒差错的办法
1.做试验时少说话,避免唾液掉进酶标条中。
2.参加一抗二抗需求放入37°。
3.假如一同做多个板子,多个板子别罗一同;尽量少用排枪。
4.加样时,由低浓度向高浓度加,这么削减跳孔的概率。
5.勤换枪头。
ELISA测定试剂盒操作技能的影响:
1)应保证清洁,全部操作过程中保证酶标板不触摸次氯酸,以上的办法可以使“花板”降至最低极限,然后进步检查的特异性,并得到更精确。
2)合理安排检查量,ELISA试剂盒避免反响板过多形成洗板等待时间长。
3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后最好在吸水纸(挑选干净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干,避免针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易发生拖带景象而导致“花板”的呈现。
5)严峻溶血:以HRP为符号的ELISA试剂盒测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色形成假阳性。
一、移液器的运用,加样(抗体)等需求精确定量的试剂时不运用排枪,经历证实排枪很不精确,很容易跳孔,不要图廉价买低档的tips 由于ELISA不但会扩大被检查的意图蛋白,也会扩大非特异联系的杂质蛋白。
二、倍比稀释样品时,稀释倍数最好要小于10。
三、一切的装跟ELISA测定试剂盒有关试剂的容器,玻璃制品的要干烤过或许运用一次性的树脂容器。
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