培养基灭菌秘籍

培养基灭菌秘籍

培养基的类型可以按照成分、物理状态分、用途、微生物种类这四个方面来规划分类。培养基的灭菌是一个常见步骤，并且，不同的培养基需根据其性能采用不同的灭菌方法，在这里，上海恒远生物公司为您一一指出：
（一）、化学物质灭菌
    原理：药物与微生物细胞中的成分反应，使蛋白质变性酶失活。使用范围：器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌，不能用于培养基灭菌。
（二）、辐射灭菌
    辐射灭菌的原理是利用高能量的电磁辐射与菌体核酸的光化学反应造成菌体死亡。常用的有紫外线、X射线和γ射线。用于室内空气及器皿表面灭菌。
（三）、干热灭菌
    灭菌原理是利用高温对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩作用而杀灭微生物。常用灼烧 和电热箱加热，140-180℃ 1-2小时 。适于对玻璃及金属用具及沙土管灭菌。
（四）、湿热灭菌
    灭菌原理是直接用蒸汽灭菌，蒸汽在冷凝时能释放出大量潜热，蒸汽具有强大的穿透力，破坏菌体蛋白和核酸的化学键，使酶失活，微生物因代谢障碍而死亡。水煮常压灭菌：100℃。或饱和蒸汽灭菌：一般121℃，30分钟。适合培养基和发酵设备灭菌。
（五）、过滤除菌
    除菌原理是利用微生物不能透过滤膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔径滤膜，用于压缩空气、酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌。   

● 器具和设备消毒处理方法：
1.湿热灭菌：采用高压灭菌器， 121 ℃灭菌20分钟，适用于玻璃器皿、移液器吸头、塑料瓶等。按照GB 15981 的规定，评价高压灭菌器的杀菌效果。
2.干热灭菌：采用干燥箱灭菌，160 ℃灭菌2h，180 ℃灭菌2h，适用于玻璃器皿，不锈钢器具等。
● 灭菌方法：
1.金属器具先用酒精擦拭，之后干热灭菌，使用时需烧灼；
2.塑料可用高温灭菌；有机溶剂需用过滤灭菌；
3.双手及操作台面可用酒精擦拭，台面及操作室还需紫外灭菌；
4.培养基需用湿热高温灭菌，至于对待不同的培养基灭菌条件都有所不同，如植物组培使用的培养基与微生物中使用的就不同。