ZipChip 微流控毛细管电泳-质谱联用技术对细胞培养液中的糖基化和蛋白质滴度的监测

2019/04/15   下载量： 4 次

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应用领域 生物产业
检测样本 其他
检测项目
参考标准 单克隆抗体蛋白的品质特性

一种快速、简便的微流控毛细管电泳—质谱联用方法，英文简称ZipChip CE-MS，用于直接检测从细胞培养上清液中获得的单克隆抗体蛋白的品质特性。同时，利用单一的微流控芯片ZipChip并采用相同的方法监测蛋白表达和产品品质，消耗的样品体积仅为10-15微升的细胞培养上清液，每个样品的分析时间在3分钟内即可完成。

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快速和灵敏的产品品质分析对于生物药的开发和生产过程中的实时监测十分重要。然而，由于蛋白质浓度低、细胞培养基质复杂，对于早期细胞系选择和工艺发展中的产品品质控制提出了挑战。在这里我们提出了一种快速、简便的微流控毛细管电泳—质谱联用方法，英文简称ZipChip CE-MS，用于直接检测从细胞培养上清液中获得的单克隆抗体蛋白的品质特性。细胞培养上清液样品可采用微流控毛细管电泳与高分离度质谱仪联用法以电荷差异性为基础进行分离。在样品还原条件下，可以确定重链上的多个蛋白糖基化属性，而滴度信息可以通过与样品中加入同位素标记的抗体轻链的信号强度的比较获得。因此，利用单一的微流控芯片ZipChip并采用相同的方法监测蛋白表达和产品品质，消耗的样品体积仅为10-15微升的细胞培养上清液，每个样品的分析时间在3分钟内即可完成。此外，用一组time-course生物反应器细胞培养样品对ZipChip CE-MS方法和传统的 RPLC-MS 方法进行了比较，结果表明，直接提取原始样品通过 ZipChip CE-MS 分析与经过蛋白纯化（ProA）处理后再进行的 RPLC-MS 分析结果间，两种方法对N-糖基化属性的表征水平相一致。图1_封面图片.jpg







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908 Devices
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