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Rnasin Inhibitor RNA酶抑制剂 10000u
产品介绍
RNA酶抑制剂产品是从人胎盘中提取的一种广谱的核糖核酸酶抑制剂,它在分子生物学的实验中有着十分 广泛的应用。它是一个在任何应用中对付潜在RNase污染的十分有用处的试剂。
酶活:40u/ul
用途:RT-PCR,
cDNA合成中mRNA的保护,
体外转录和体外翻译,
制备RNase-free的抗体,
原位杂交和mRNA定位等,
核糖核酸酶抑制剂以20 mM HEPES-KOH(pH7.6)、50 mM KCl、8 mM DTT、50%(v/v)甘油制备。
来源:人胎盘。
活性范围:pH5-9(高活性pH7-8)
存储条件:有关存储建议,请参见产品信息标签。避免多次冻融循环和频繁的温度变化。
单位定义:一个单位被定义为抑制核糖核酸酶A 5ng活性50%所需的RNASIN®核糖核酸酶抑制剂的量。活性通过核糖核酸酶A对胞苷2′,3′-环磷酸水解的抑制作用来测定。
用法说明:核糖核酸酶抑制剂在较宽的酸碱度范围内具有活性,但至少需要1毫米的二硫苏糖醇来维持活性。浓度梯度可能在冷冻产品中形成,并应在解冻时分散。使用前充分混合。
质量控制分析
污染活性核糖核酸酶分析:检测RNase活性的存在,1克g RNA与200单位天然核糖核酸酶抑制剂在37°C孵育1小时,然后在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察RNA,以验证是否存在降解,以检测潜伏核糖核酸酶活性的存在,核糖核酸酶抑制剂在67℃下热变性15分钟,在37℃下与200克单位的RNA孵育1小时,然后在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察RNA,以确认没有降解。
dnase分析:为了测试dnase活性,50ng放射性标记的DNA在37°C下与200单位的核糖核酸酶抑制剂孵育1小时,并通过TCA可溶物质的闪烁计数监测放射性标记的核苷酸的释放。最小合格规格小于3%的放行。
内切酶分析:为了测试内切酶活性,将1微克超螺旋质粒DNA与200单位核糖核酸酶抑制剂在37°C的限制酶缓冲液(6 mM Tris-HCl[pH7.5],50 mM NaCl,6 mMgCl2,1 mM DTT)中孵育2小时。孵育后,将超螺旋(I型)DNA在溴化乙锭染色琼脂糖凝胶上观察,以验证没有可见切口或切割。
物理纯度:根据SDS聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色判断,纯度大于90%。
由于核糖核酸酶通常在变性条件下保持活性,因此必须注意避免核糖核酸酶抑制剂分子变性。为防止活性核糖核酸酶的释放,应避免温度超过50°C和高浓度尿素或其他变性剂浓度过高。
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