产品详情
Sybr green I 核酸染料(电泳级)(10000x)50ul
产品介绍:
采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是最灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBR GreenⅠ的低检出限:20pg DNA(254nm); 60pg DNA(300nm 紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射),比EB灵敏20至100倍。 SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
产品特点:
1.无毒性:属花箐类染料,容易生物降解,无致癌毒性。
2.灵敏度高:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25~100倍。
3.信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
4.操作简单:无须脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。
5.适用范围广:可适用于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。
6.使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。
7.经济:价格比银染便宜。
使用说明:
该产品使用方法同EB.
点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后静置5min后直接上样。 胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50-70℃(感觉不烫手)加入该原液10ul。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。
注意事项:
1. SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。
2. 胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5-10倍后使用。
3. 在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
4. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。
5. 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
6. SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
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