产品详情
PreScript One-Step RT-PCR Kit(Dye Plus)
产品概述
PreScript One-Step RT-PCR Kit(Dye Plus)采用了一步(One Step)RT-PCR 法。RNA → cDNA → PCR 一 管式反应,反应中途不需开盖添加任何试剂,降低污染风险。同时反应液中已含有电泳时所必需的色素试剂(二甲苯蓝和橙黄G),反应后可以直接进行电泳。
该试剂盒反转录反应使用了新型反转录酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,PCR反应应用了Hot Start型DNA聚合酶C-SsoRobust Taq DNA Polymerase,大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。在本试剂盒含预混型的Prescript One-Step Enzyme Mix;及 2× One-Step RT-PCR Buffer(Dye Plus),简化了试剂盒组分,使反应液配制更为方便快捷。使用本试剂盒可进行高效的RT-PCR扩增。反转录温度设定为50℃,可有效抑制非特异性扩增。
产品内容组分 | LM036A | LM036B |
Prescript One-Step Enzyme Mix | 100 μL | 400 μL |
2× One-Step RT-PCR Buffer(Dye Plus) | 625 μL× 2 | 1.25 mL× 2 |
Control F-1 Primer(20 μM) | 20 μL | 80 μL |
Control R-1 Primer(20 μM) | 20 μL | 80 μL |
Positive Control RNA | 20 μL | 80 μL |
RNase Free ddH2O | 625 μL× 2 | 1.25 mL× 2 |
产品优势
扩增能力强:该试剂盒扩增长至3 kb基因片段,产物可用于TA克隆
检测灵敏度高:可检测低至10 pg的Total RNA,满足RNA检测的需求
操作简便:一管式反应,大程度减少移液次数,避免操作失误 及交叉污染
实验案例
1. 扩增能力及灵敏度
以Hela细胞来源的20 ng Total RNA为模板,扩增片段长度为0.5 kb~3.0 kb的基因片段,结果表明,本产品可轻松扩至3 kb,且无明显非特异产生。
将人293T细胞来源的100 ng Total RNA进行10倍梯度稀释,共5个梯度(100 ng~10 pg),扩增基因为GAPDH,片段长度为0.8 kb的基因片段,实验结果表明,PreScript One-Step RT-PCR Kit检测限低至10 pg。
应用范围
一步法RT-PCR、病毒RNA检测 、mRNA基因克隆、TA克隆
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