产品详情
Prescript Ⅲ RT ProMix For qPCR（+gDNA clearer）
产品概述
本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase，包含合成高质量cDNA所需的所有成分，适用于两步法RT-qPCR检测。通过定点突变得到的PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是RNase H活性缺失的全新逆转录酶，该酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升。4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染，保证后续定量结果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers、dNTPs和gDNA clearer终止成分，保证cDNA的完整性。此外，产品针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix，可以在15 min内短时高效地合成qPCR所用的模板cDNA。
产品内容| 组分 | LM421A | LM421B |
| 4× gDNA clearer | 200 μL | 400 μL |
| 10× RT Reaction Mix | 100 μL | 200 μL |
| Prescript Ⅲ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
| RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
高度的热稳定性：全新的逆转录酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有更好的热稳定性
对复杂模板具有良好的延伸性能：在50℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸
模板兼容性高：兼容不同物种及完整度较差的Total RNA
强劲的基因组DNA清除能力：4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染，保证后续定量结果更加可靠
实验案例
1. gDNA Remover对基因组DNA去除效果的确认
为了确认gDNA Remover对基因组DNA的去除效果，按以上表格条件进行了逆转录反应，接着用同一基因进行Realtime PCR检测。结果显示，用gDNA Remover处理后，即在③的条件时，没有扩增出现，可以确认基因组DNA已被去除掉。
2. 与其他公司同类型产品基因组DNA去除能力的比较
在HeLa total RNA中添加过量的人基因组DNA，与其他公司同类型试剂盒进行基因组DNA去除能力的比较模拟实验。结果显示，本产品去除基因组DNA效果更加明显。
3. 优异的cDNA合成效率
在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg，分别进行逆转录反应。然后，在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V)，用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量，然后进行cDNA合成量的比较。结果可见，在探讨的范围内，模板RNA的量和cDNA的得率密切相关，但无论模板RNA量的多寡，仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间，逆转录反应效率的变化并不大，因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。
4. 与其他公司逆转录性能的比较
以梯度稀释的HeLa细胞Total RNA为模板，在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录，然后用Realtime PCR 进行检测。结果表明，与A公司同类产品相比，PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase产品具有更高的逆转录性能。
5. 对不同模板的逆转录能力
以HeLa细胞Total RNA为模板，挑选高、中、低三种表达量的基因，在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录，然后用Realtime PCR检测多对基因，结果表明，对不同表达量的基因，本产品都具有优异的逆转录能力。
应用范围
合成用于qPCR的cDNA模板，高质量 cDNA合成；全长cDNA文库的构建等。
产品存储
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