供货周期: | 现货 |
品牌: | LMAI Bio |
规格: | 50次 |
货号: | LM-F088 |
CAS号: |
柱式凝固血液DNAout
产品及特点
本产品是在基因凝固血液 DNAOUT(CAT#:71002)基础上改进的柱式升级产品,专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组 DNA。跟凝固血液 DNAOUT 相比,它具有下列特点:
1. DNA 更加纯净,OD260/280 在 1.8-2.0 之间,可直接用于 PCR、酶切、杂交等。
2. 操作更加简单快捷,比凝固血液 DNAOUT 快十分钟以上。
3. 每克新鲜凝固全血 DNA 产量为 20-50 ug DNA。
4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分 成 份 编 号 大纸盒包装
柱式凝固血液 DNAOUT溶液 A 71204A 50 mL 71204B 50 mL 71204C 50 mL 离心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脱液 2.0 111205 10 mL 使用手册 71204sc 1 份
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂 氯仿
使用方法
1. 65℃预热溶液 A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取 1 mL 到 10 -15 mL 塑料离心管中并将离心管放置于 65℃待用。
2. 称取凝固血液 0.1-0.5 g,加入到预热的溶液 A 中短暂匀浆(必须使用剪切式匀浆机)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。注意:如果是干的血块,用量不要超过 0.2 g,但需将干血块剪成微小的碎片。也可以将凝固血块液氮研磨成粉后转移到装有溶液 A 的离心管中。
3. 将匀浆液置于 65℃水浴保温 5 分钟,然后将不超过 0.75 mL 的匀浆液上清转移到新的 1.5 mL 离心管中。注意:尽量不要转移凝固血液碎片。
4. 在上清液中加入等体积的溶液 B,上下颠倒 30 秒充分混匀。
5. 冰浴 5 分钟。
6. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,将上清液转移到新的 1.5 mL 离心管中。
7. 在上清中加入 0.2 mL 的自备氯仿,震荡器上充分振荡 30 秒混匀。
8. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,两相交界面将有白色膜状物。
9. 将上清液(大约 0.6 mL)小心转移到新的 1.5 mL 离心管中。
10. 在上清液中加入 1.5 倍体积的溶液 C,上下颠倒 30 秒混匀。
11. 分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后需要 12000-15000 g 离心半分钟并弃穿透液。
12. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液,12000-15000 g 离心半分钟。
13. 在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液,12000-15000 g 离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
14. 12000-15000 g 离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意:此步不能省略,否则残留的通用洗柱液会影响 DNA 的后续反应。
15. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入 30-100 uL DNA 洗脱液 2.0,12000-15000 g 离心半分钟,管底溶液即 DNA 溶液,可立即使用或放冰箱长期保存。
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