供货周期: | 现货 |
品牌: | LMAI Bio |
规格: | 50次 |
货号: | LM-F298 |
CAS号: |
LAMP扩增阳性对照
产品及特点本产品为 LAMP 扩增专用的阳性对照,用于判断、分析 LAMP 等温扩增结果。LAMP 等温扩增,即 Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增),是 2000 年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4 条模板专一的特异引物和具有链置换能力的 DNA 聚合酶,在等温条件下63℃左右)30-60 分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于 PCR 技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。
运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 LAMP Mix 、Bst DNA 聚合酶、MgCl2 溶液、超纯水等
使用方法 1. 在冰上溶解除酶外的各种组份,其中 LAMP Mix(2× )、MgCl2(25 mM)和 Bst DNA 聚合酶(8 U/uL)等试剂自备(参照本公司产品 100203组分),混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:成份 阴性对照管 阳性对照管
LAMP Mix(2×) 10 uL 10 uL
对照引物混合物 4.0 uL 4.0 uL
对照模板 DNA 不加 1 uL
MgCl2(25 mM) 3 uL 3 uL
Bst DNA 聚合酶(8 U/uL) 1.5 uL 1.5 uL
水 1.5 uL 0.5 uL
2. 混匀,置于 60-65℃保温 120 分钟。
3. 80℃下保温 10 分钟灭活 Bst DNA 聚合酶。
4. 产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
1) 琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物 5 uL,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP 特征性电泳图谱;
2) 向扩增产物中直接加入本公司 PCR 级绿如蓝染料(另售)1 uL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
3) 荧光定量检测。
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