| 供货周期： | 现货 |
| 品牌： | LMAI Bio |
| 规格： | 50次 |
| 货号： | LM-F410 |
| CAS号： |
动植物总蛋白微量提取试剂盒
产品及特点
本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和 Western
印迹分析以及蛋白活性测定等。本产品的其主要特点是：
1. 提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3. 适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 电泳、Western 印迹分析以及
蛋白活性测定等下游实验。
5. 一次可以处理 100mg 左右的样品，足够进行几十次 SDS-PAGE mini 胶电泳
检测。
运输及保存 常温运输和保存，但收到货后 5×SDS-PAGE 上样液需-20℃保存，频繁使用时可
以放 4℃保存，产品有效期为出厂后一年。
使用方法
使用前，好请在动植物总蛋白微量提取溶液 A 中加入自备的、新鲜配制的 1M
DTT 溶液 50uL。
一：匀浆法
注意：对致密的实体组织（如肌肉），好用 Polytron 剪切式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品 100 mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到 10-15 mL 的塑料离心管中。
2. 加入 1mL 动植物总蛋白微量提取溶液 A，在冰上用 Polytron 剪切式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到 1.5 mL 的塑料离心管中。
4. 4℃ 12,000 g 离心 10 分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行 SDS-PAGE 电泳，可取部分到离心管中，加入 5×SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分钟后立即上样电泳。
二：直接研磨法
注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵，也可以使用与微量离心管式的研磨杵
1. 称取动物或植物组织样品 100 mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入 1mL 动植物总蛋白微量提取溶液 A，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到 1.5 mL 的塑料离心管中。
4. 4℃ 12,000g 离心 10 分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行 SDS-PAGE 电泳，可取部分到离心管中，加入 5×SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分
钟后立即上样电泳。
三：液氮研磨法
注意：好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约 100 mg 动物或植物组织样品，转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入 1mL 动植物总蛋白微量提取溶液 A 溶解，然后将溶液全部转移到 1.5 mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12,000 g 离心 10 分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行 SDS-PAGE 电泳，可取部分到离心管中，加入 5×SDS-PAGE 上样缓冲液使其终浓度为 1×（加入样品体积的 1/4 即可，40uL 样品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上样缓冲液），在沸水中水浴 5 分
钟后立即上样电泳。
注意：
1．如果 4℃ 12,000 g 离心 10 分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀，可以将上清转移到一个新的离心管中后再 4℃ 12,000 g 离心 10 分钟，以去除可见的小碎片。
2．植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在后得到的上清液中加入 5倍体积的冷丙酮或冷甲醇，混匀后-20℃放置 1 小时或过夜，然后 4℃12,000 rpm 离心 10 min，弃上清后室温风干 3-5 分钟，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性，不能再用于活性检测。
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