辣椒红色素和辣椒油树脂是从辣椒中提取的可作为天然着色剂的食品添加剂,广泛应用于各类食品的着色。但是很多不法商家为了获得颜色更加鲜艳的着色剂以牟取利润,在辣椒中添加苏丹红这种非法染料,导致本身安全无毒的天然着色剂变成了毒染料,并且这种毒染料严重危害人体健康。
国标GB/T19681-2005中有针对辣椒制品中苏丹红的检测方法,但因辣椒红色素和辣椒油树脂颜色较深,基质组成较为复杂,导致国标中的检测方法难以适用,纳谱分析SelectCore SDR-2固相萃取柱可以快速、高效的提取、检测辣椒制品中的苏丹红,方法具有灵敏度高、重现性好、试剂用量少、油脂去除率高等优点。
本实验针对两种不同来源(辣椒红色素、辣椒油树脂)的苏丹红进行提取和检测。
适用范围
该方法参照GB/T 19681-2005食品中苏丹红染料的检测方法-高效液相色谱法,用于测定辣椒制品中苏丹红的含量。
实验步骤
样品制备
辣椒红色素和辣椒油树脂:称取5 g无水硫酸钠于15 mL离心管中,加入0.5 g样品,再加入10 mL甲醇,漩涡混匀1 min后,4000 r/min离心后取上清液备用。
其他辣椒制品:参照国标GB/T 19681-2005中样品制备方法。
净化
(1)活化:SelectCore SDR-2固相萃取柱,规格500mg /6mL,依次使用4 mL乙酸乙酯、4 mL甲醇、4 mL纯水活化小柱;
(2)上样:加入制备好的上清液,弃去流出液;
(3)淋洗:使用10 mL 70%甲醇水溶液淋洗,弃去淋洗液;
(4)洗脱:加入8 mL洗脱液,洗脱液配比为乙酸乙酯:甲醇:甲酸=89:9:2(体积比),收集全部洗脱液;
(5)洗脱液于50 °C下氮气吹干,使用1 mL乙腈定容,过滤膜后用于液相色谱分析。
液相色谱仪器条件
色谱柱:ChromCore C18 3 μm,4.6 ×150 mm
检测波长:520 nm
柱温:30 °C
进样体积:20 μL
流速:1.0 mL/min
流动相:流动相A:0.1%甲酸水溶液,流动相B:0.1%甲酸乙腈溶液
洗脱梯度:
实验谱图及加标回收率数据
加标回收率结论
使用中性氧化铝固相萃取柱测定辣椒红色素的加标回收率,由图8可以看出4种苏丹红受基质干扰大,目标物与杂质的分离度较差,影响检测;4种苏丹红的加标回收率分别为40.94%、27.29%、36.96%、24.15%,不符合检测要求。
由以上色谱图和加标回收率数据可以看出,SelectCore SDR-2固相萃取柱特别适合于复杂基质的辣椒制品检测,并且净化样品效果优良,加标回收率符合检测要求。
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