模拟单抗偶联药物在BioCore HIC-Butyl上的分离

2020/08/04   下载量： 0 次

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应用领域 制药
检测样本 原料药
检测项目 含量测定>色谱法
参考标准 无

疏水作用色谱HIC是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质等生物大分子的常用方法，也是测定ADC中DAR的重要手段。在HIC模式下，高盐浓度将待分离的样品吸附在固定相上，然后线性或阶段降低流动相中盐浓度有选择性地将样品洗脱。分离过程中，随着流动相中盐浓度的降低，疏水性弱的蛋白先被洗脱下来，而疏水性强的蛋白随后才被洗脱下来，BioCore HIC-Butyl对模拟单抗偶联药物中不同效价的分离具有很好的选择性。

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配置单
方案详情

Column: BioCore HIC-Butyl, 5 μm

Dimension: 4.6x100 mm

Mobile phase A: 2.0 M (NH4)2SO4 in 100 mM phosphate buffer, pH7.0

Mobile phase B: 100 mM phosphate buffer, pH7.0

Mobile phase C: Isopropanol

Gradient: t (min) %A %B %C

-10 75 25   0

0 75 25   0

1 75 25   0

15   0 75   25

20   0 75   25

Flow rate: 1.0 mL/min

Temperature: 30 ℃

Injection: 10 μL

Detection: UV 280 nm

Sample: Simulated ADC (~1mg/mL in mobile phase A)


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文献贡献者

纳谱分析技术(苏州)有限公司
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