供货周期: | 现货 |
品牌: | 钦诚生物 |
规格: | 1.5ml |
货号: | QC60201-1.5 |
CAS号: |
非酶DNA清除剂
英文名称:DNA Erasol
运输:常温
保存:常温
有效期:1年
货期:现货
其他:
产品介绍:
非酶法去除DNA
产品及特点
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些
污染会影响下游的 RT-PCR 和 Northern 杂 交 等 实 验 。 目 前 最 常 用 的
RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整
性而具有很大缺陷。非酶法DNA清除剂不但彻底避免了
RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比
高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA
分子完整性不会受到任何影响。
2. 不含RNase污染,因为本产品为非酶产品, 所用溶液又经过的
液 相 RNase 清 除 剂 的 处 理 ( 能 不 可 逆 地 灭 活 RNase) ; 而 在 制 备
RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,
所以终产品中往往残留有RNase污染。
3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟,不需要37℃保温和
酚/氯仿抽提;而使用RNase-free DNase时,需要上述处理,增加了污
染RNase的可能性。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free
DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于 RNase-free DNase。
6. 只能回收长度在 200nt 以上的 RNA(DNA Erasol-2 可以回收长度在
200nt 以上和以下的 RNA)。
运输及保存 常温运输、4℃保存,有效期一年。
自备试剂 70%乙醇
使用方法 1. 将总 RNA 溶液与 DNA Erasol 按 3:1 的比例混合(即 300 uL RNA
溶液需加 100uL DNA Erasol)。
2. 12000-15000 g 室温离心 10 分钟后小心弃上清,
3. 在沉淀中加入 1 mL 自备 70%乙醇,震荡半分钟。
4. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟后小心弃上清。
5. 将离心管短暂快速离心,小心吸弃余液。
6. 加入适量 RNase-free 水或液相 RNase 清除剂溶解 RNA 沉淀,立即使
用或放-80℃长期保存。
注意:本产品只能回收长度在 200nt 以上的 RNA,RNA 样品中含有小 RNA,
将会丢失。对如果要去除小 RNA 样品中的 DNA 污染,建议使用的
DNA Erasol-2(CAT#:70801)
使用效果 图注:在RNA中加入DNA污染,然后将样品
分为A和B两组,A不经本产品处理而B经过处
理,然后分别将A和B稀释1(原液),10,100
和1000倍,后取5 uL进行PCR。A样品稀释
100倍后还有扩增,而B样品原液也只有很微
弱的扩增。
相关资料 RNase-free DNase 制备方法
去 除 DNase 中 RNase 的 方 法 有 agarose-coupled amino
phenylphosphoryl-uridine-2' (3')-phosphate 亲和吸附法(NAR,4:241,
1977) ,DEAE-cellulose 吸附法(Anal. Biochem.14:269 , 1966),
Macaloid 吸附法 (Molecular Cloning p452, 1982)和 Iodoacetate 灭活
法 (JBC 244:924,1969)。从原理上将讲,用吸附法彻底去除 RNase 几乎
是不能的,就如想在温和条件下让一个化学平衡反应只向一个方向进行一样。
另外,当时检测 RNA 完整性的方法是靠最原始的密度梯度离心法,十分粗糟。
即便用这样的方法,数篇文章都提到残留的 RNase 十分难以去除。研
究表明,在 E.coli 细胞中就存在 20 余种 RNase,而作为原材料的牛胰 DNase
所含 RNase 种类肯定也不在少数,用特异性本来就很差的吸附法同时去除
DNase 粗产品中的各种 RNase 几乎是不可能的。初步的实验结果
也显示,使用上述方法非常难以得到真正的 RNase-free DNase。所以使用
RNase-free DNase 时一定要严格按厂家提供的操作手册执行,过长时间的
保温和用量都有可能降解您珍贵的 RNA。
疑难解答 Q: 能否将本产品用于去除蛋白质溶液中的 DNA?
A: 不能,只能用于去除 RNA 溶液中的 DNA 污染。
相关产品
UPCISCC090 人舌头鳞癌细胞 QCH766
KNS62 人肺支气管鳞状细胞癌 QCH767
HCC95 人肺腺癌细胞 QCH768
HARA 人肺腺癌细胞 QCH769
EPLC272H 人肺腺癌细胞 QCH770
NCI-H810 人非小细胞肺癌细胞 QCH771
HBL-1 人弥漫性大B细胞淋巴瘤 QCH772
FTC238 人滤泡状甲状腺癌细胞,肺转移 XY-H773
SNU-719 人胃癌细胞 QCH774
BT549+GFP+LUC 人乳腺癌细胞 QCH766GL
IM95m 人胃癌细胞 QCH775
mda-mb-468+GFP+LUC 人乳腺癌细胞 XY-H776LGP
OCUM-1 人胃癌细胞 QCH777
Karpas422 人非霍奇金淋巴瘤 QCH778
CAL-33 人舌鳞癌细胞QCH779
关注
拨打电话
留言咨询