供货周期: | 现货 |
品牌: | 钦诚生物 |
规格: | 50次 |
货号: | QC80202-50 |
CAS号: |
柱式DNA PAGE胶回收试剂盒
英文名称:Column PAGE DNABACK
运输:常温
保存:常温
有效期:1年
货期:现货
其他:
产品介绍:
用于回收PAGE电泳后得到的DNA片段,柱式法
产品及特点
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段 DNA 的主要方法,但是目前市场
上没有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收 DNA 片段,本产品就是专
门为此用途而开发的、从 PAGE 凝胶中回收 DNA 片段的试剂盒。它具有下列特点:
1. 高效,采用高效的溶液使 DNA 快速从 PAGE 中扩散出来,使回收效率 50-90%
(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2. 可回收 50 bp-500 bp 的 DNA 片段(如果片段长度超过 5100bp,建议使用
琼脂糖分离回收方法)。本产品也能回收单链 DNA。
3. 操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。
4. 纯度高,采用能专一结合 DNA 的硅胶膜是杂质和 DNA 分离,回收的 DNA 可
直接用于酶切、连接、PCR 登等多种分子生物学实验。,
5. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
运输及保存 常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。 自备试剂 PAGE 胶
使用方法 1. 切取含 DNA 片段的 PAGE 凝胶(100 mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,
否则会影响回收效率),放入 1.5 mL 离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(
先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2. 按重量比为 1:2 的比例加入溶液 A(100 mg PAGE 凝胶需要加入 200 uL 溶
液 A)。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃 1-10 个小时以让 DNA 从 PAGE 凝胶中扩散出
来。如果 DNA 片段超过 500 bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到 45-65℃,
DNA 扩散速度会增加。
4. 12000-15000 g 室温离心 2 分钟,将含 DNA 的上清液转移到新的离心管中。
5. 再用 100 uL 的溶液 A 洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6. 加入 900 uL 通用溶胶液和 0.3 mL 溶液 B,混合均匀后将离心管中的溶液分
两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置 3 分钟,然后再 12000-15000
g 离心 1 分钟,倒掉收集管中的液体。
7. 加入 600-800 uL 通用洗柱液于离心柱中。
8. 12000-15000 g 离心 1 分钟,倒弃收集管中的废液。
9. 12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入 25-50 uL 通用洗脱
液,静置 3 分钟。
11. 12000-15000 g 离心 1 分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的 DNA 溶液,可
立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
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